除上表所列试剂外,还需准备以下溶液。下表列出每步所需物品概览:

步骤

设备

试剂

样品准备

section 3.2

黏附细胞,细胞涂片

和细胞离心涂片准备

section3.2.1

section3.2.2.2

Washing buffer

:磷酸缓冲液

PBS*

Bloking

buffer

封闭缓冲液:

溶于甲醇的

3%H2O2

Fixation solution

固定剂:溶于

PBS

4%

多聚

甲醛,

ph7.4

,新鲜配制

Permeabilisation solution

渗透溶

液:溶

0.1%

柠檬酸钠的

0.1%Triton

X-100

新鲜配制

(

6

)

固定剂

section3.2.2.1

二甲苯和乙醇(浓度:

95%

90%

80%

70%

,溶

于双蒸水中)

Washing buffer

PBS*

蛋白酶

K*

不含核酸酶,

工作浓度:

[10-20ug/ml

溶于

10mM Tris/HCL

中,

ph7.4-8]

替代处理方案

※渗透溶液:

(

0.1%Triton

1

)

X-100

,溶于

0.1%

柠檬酸钠的,新鲜配制

※胃蛋白酶

*

(

0.25%-0.5%

,溶于盐酸中,

ph2

)

或胰蛋白酶

*

0.01N HCL

,不含核酸酶

0.1M

柠檬酸缓冲液,

ph6

,微波照射

标记步骤

section3.3

section3.3.1

微球菌核酸酶或

DNase I

,重组,级别

1*

黏附细胞,细胞涂片

Parafilm

Washing buffer

PBS*

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