扁豆凝集素/红藻凝集素GRFT/蓝藻凝集素CVN/香蕉凝集素H84-植物凝集素

凝集素是一类特异性识别糖链的蛋白质,发挥天然抗病毒功效。目前已鉴定出红藻凝集素GRFT、蓝藻凝集素CVN、香蕉凝集素H84T等对于HIV、流感病毒和冠状病毒都有一定的抑制作用。然而目前尚未有实验探究凝集素对新冠病毒的抑制作用,发现新型凝集素对广谱抗病毒药物开发具有重要意义。

通过盐析法、离子交换层析、凝胶过滤、亲和层析一系列操作对提取物进行分级分离,筛选富集对H5N1具有较强微中和活性的组分,通过电泳发现为包含五种肽段的寡聚蛋白,质谱分析显示该蛋白质为扁豆凝集素(FRIL)。已有研究表明扁豆凝集素单体具有一个糖结合结构域,但在溶液中的状态未得到确定,综合利用多角度光散射、动态光散射、电镜复染,发现扁豆凝集素为四聚体结构。

进一步在体外定量测定了扁豆凝集素的抗病毒活性,空板减少试验与微中和试验显示PRNT50与EC50约0.7ug/Ml。利用11种流感毒株测定中和谱,发现除实验室菌株A,扁豆凝集素能以纳摩尔水平抑制不同亚型毒株。研究者通过鼻腔给药在小鼠体内评估凝集素的作用,凝集素抗病毒活性表现剂量依赖,高剂量给药能够明显延长存活时间甚至保护免受感染。

扁豆凝集素抗病毒活性

扁豆凝集素是已知的甘露糖/葡萄糖特异性凝集素,但关于扁豆凝集素与复杂糖基化的结合机制还有待了解。研究者将接种流感病毒的鸡胚进行α-甘露糖酶抑制剂并在回收时利用切割高甘露糖的内切糖苷酶处理,纯化后利用串联质谱、免疫印迹分析。结果发现扁豆凝集素主要结合流感病毒血凝素,而且主要结合复合型糖链而不是高甘露糖链,这与其他凝集素有很大不同。为了探明这现象背后的机制,研究者利用荧光探针标记的扁豆凝集素,发现与1,3或1,4岩藻糖基化N乙酰葡萄胺的复合型糖链结合较好。

小扁豆凝集素-琼脂糖凝胶

Acitavated CH Sepharose 4B

Acitavated CH-琼脂糖凝4B

Calmodulin Sepharose4B

钙调素-琼脂糖凝4B

Lentil lectin Sepharose4B

小扁豆凝集素-琼脂糖凝胶4B

双花扁豆凝集素(DBA)

黑皮扁豆凝集素

FITC-LCA 绿色荧光标记小扁豆凝集素

荧光探针标记的扁豆凝集素

扁豆凝集素凝胶

辣根过氧化物酶标记的刀豆凝集素(HRP-ConA)

辣根过氧化物酶欧曼陀罗凝集素((HRP-DSA)

辣根过氧化物酶麦胚凝集素(HRP-WGA)

辣根过氧化物酶小扁豆凝集素(HRP-LCA)

血清α1抗胰蛋白酶小扁豆凝集素

刀豆凝集素单克隆抗体

菜豆凝集素(PHA)单克隆抗体

美洲商陆(PWM)单克隆抗体

花生凝集素(PNA)单克隆抗体

扁豆凝集素(LcA)单克隆抗体

流脑多糖协同扁豆凝集素

扁豆凝集素十六烷基季铵盐包裹磁性纳米颗粒

小扁豆凝集素(LCA)的琼脂糖微量离心柱分离AFP-L3

改性凝集素包裹的磁性大分子脂质体纳米微球

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