肌电信号 原始信号 积分_实验室人必看!复杂的色谱峰要如何正确积分?
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色谱峰积分方法,最为重要的是确保色谱峰面积的积分正确。较为复杂的色谱图,如果存在拖尾、前伸、相邻色谱峰发生部分重叠、肩峰等现象,就要调整积分方法,采用正确的切割方式分割色谱峰,以获得准确的积分结果。
简介
随着计算技术的发展,色谱峰面积的获得变得更加容易——色谱工作者已经不再使用读数显微镜、剪纸称重等低效率的手段,色谱数据工作站可以在分析结束后(甚至分析过程中)数秒钟内给出色谱峰面积的数值。然而问题随之而来,色谱数据工作站给出的峰面积是不是正确的呢?尤其是面对较为复杂的色谱峰(例如两个或者多个色谱峰发生重叠、色谱峰拖尾或者前伸、肩峰等),势必面临色谱峰切割的问题,如何判定色谱峰切割正确就成为新的问题。
积分方法
不论采取何种手段,确保色谱峰积分正确都是最为重要的原则。虽然色谱分析实验过程中,一般要求通过调整分析条件,使得样品中各个组分的色谱峰尽可能完全分离。色谱峰分离度不良、色谱峰前伸或者拖尾严重等现象往往会带来不同程度的峰面积积分误差。但实际工作中,因为样品较为复杂的原因。并非总可以满足分离度大于1.5,即完全分离的情况。那么色谱数据工作站就会面临处理复杂色谱图的工作问题。例如,图1所示的某复杂色谱图:
图1 复杂色谱图示例
谱图“看上去”是由3个色谱峰组成的。那么应该采用什么方式来切割呢?色谱数据工作站可能会给出两种解决方案(图2或者图3),哪一种方案更好呢?
图2 色谱数据工作站解决方案1
图3 色谱数据工作站解决方案2
色谱数据信号本质上是电气信号,电气信号本质上是可以叠加的,那么复杂色谱信号也可以视为由简单色谱信号叠加而成。或者说,某一个“较为复杂”的色谱峰信号,是由两个或者多个“较为简单”的色谱峰信号的加和,如果可以模拟出“简单”色谱信号,那么就可以积分得到相对正确的色谱峰面积。
借助简单的数学工具(甚至Microsoft 的Excel),可以模拟一下该色谱图的原始信号,在Excel 数据表格中输入不同的两个正态分布数列(该数据明显的特征是,发生重叠的两个色谱峰的峰高差异较大,Excel两个数列的强度比值为10:1)。将此两个数列加和,并对此三列数据建立拟合曲线,如图4所示:
图4 模拟色谱图
图4中的灰色曲线相当于原始色谱图,此色谱图由蓝色和红色色谱图加和而成。通过该计算,如果采用图2所示的积分方式,会带来较大的积分误差。
发生部分重叠的两个色谱峰,如果峰高差异较大,应当采用切线方式(或成为拖尾方式、撇去方式)切割,使获得的峰面积更为准确。
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| 原题目:【第十三届原创】较为复杂的色谱峰应该如何积分
| 原作者:安平
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