前几期小编给大家介绍了如何做一个组间网络分析图(Network Analysis)
在线作图丨绘制组间网络分析(Network Analysis),有小伙伴希望小编更新一期组内互作网络的说明。所以,它来了~

Q1:什么是网络分析(Network Analysis)?
网络分析(network analysis)是通过计算特征值间的相关系数,寻找变量之间的联系,以网络图或者连接模型(connection model)来展示数据的内部结构,并将显著相关的特征节点用不同粗细的线相连来表示不同变量(物种或基因等)间的相互作用关系。从而简化复杂系统并提取有用信息的一种定量分析方式。在生态学中常利用相关性来构建网络模型,可以使用一个数据集例如物种群落数据进行分析,这时候展现物种之间的共出现模式(co-occurance pattern),也可以结合多个数据集进行分析,例如分析环境因子对物种的影响等。

组内互作网络图反应的是一组数据内部不同元素间的关联性。如:微生物物种间的相互关系等。图中每个圆圈可以代表一种微生物、基因、蛋白质或者代谢物等,连线代表元素之间的相关性高低。TUTU云平台的组内网络分析中不同颜色的圆圈对应不同的元素聚类。如果有分组信息,图图还能在节点上以饼图的形式显示该物种上的权重(左)目前网络分析的常见展现形式有分散型(中)和球型(右),通过Gephi软件可以将分散的点转换为球型布局。

Q2:能否不学R语言就能做网络分析?
小编和他的小伙伴们开发了一个在线的作图小网站——图图云(www.cloudtutu.com,免费的哦~),操作步骤如下:
①登录网址:www.cloudtutu.com(推荐使用360或者谷歌浏览器)
②输入用户名和密码(小编已经为大家填好了,如果不显示可添加文末二维码添加小编获取),输入验证码后即可登录;
③登录后在工具一栏(高级分析)里找到组间网络分析,点击进入;
④请按照界面右侧的说明书或者下文进行操作,即可在2分钟内获得一张精美的组内Network图喽~
话不多说,我们开始行动吧~

Step 1 上传数据
※目前平台仅支持.txt(制表符分隔)文本文件或者.csv文件的文件上传;
平台可对不规范的数据格式进行部分处理,但还是请您尽量按照示例数据的格式调整数据,以便机器可以识别。
a) 准备一个数据矩阵(如微生物物种丰度表、基因表达量矩阵、代谢物含量表,也可以是测量数据,例如身高、体重、表型等);
b) 表格需要带表头和列名,第一行为样本名,第一列为组成因子名,例如OTU ID,基因ID、身高、代谢物名称等。
c) 请提交txt(制表符分隔)文本文件或者.csv文件。操作方法为:全选excel中的所有内容(ctrl+A),复制到记事本中,将记事本文件另存后上传该.txt文件。

Step 2 设置参数
可以根据自己需求选择计算方法,调整绘制数量,调整seed值,调整线条颜色,调整显示标签比例,设置好参数后点击运行按钮即可生成对应图片。

2.1 计算方法:
(1)Pearson相关系数(皮尔逊积差相关系数)
适用于两个正态分布的连续变量。
(2)Spearman等级相关系数(斯皮尔曼秩相关系数)
利用两变量的秩次大小来进行分析,属于非参数统计方法。适用于不满足Pearson相关系数正态分布要求的连续变量。也可以用于有序分类变量的之间的相关性测量。
Tips: 皮尔森评估的是两个变量的线性关系,而斯皮尔曼评估的两变量的单调关系。斯皮尔曼相关系数对于数据错误和极端值的反应不敏感。

2.2 绘制数量:选取丰度排名前多少的元素进行绘图,上线为200,大于200个元素绘制的图片很乱,影响可解释性,不推荐使用。
2.3 Seed值:用来微调图片布局的参数。
2.4 线条颜色:图中连线的颜色,以浅灰色为主。
2.5 标签比例:图中标签的字体大小。
2.6 是否分组:可根据需求选择是否对数据进行分组。
在绘图区的下方对分组信息进行在线编辑,也可点击“输入分组”手动粘贴分组信息,如图:第一列为样品名称,第二列为样品组名。
有分组信息时,图中圆圈会以饼图的形式展示组间该元素的含量差异。如图:


Step 3 下载文件
根据个人需求进行参数调整后点击运行后等待5-10秒即可下载结果,平台提供PDF格式的矢量图下载。Network Analysis结果还包含了点(node)和边(edge)文件下载,用户可下载点/边文件用Gephi软件对网络图进行进一步调整。

Step 4 作图后处理
TUTU云平台提供的是PDF格式的矢量图,可通过矢量图处理软件(Inkscape或AI)进行编辑和调整(如:文字字体,文字大小,图片分辨率等)。Network Analysis结果还包含了点(node)和边(line)文件下载,用户可下载点/边文件用Gephi软件对网络图进行进一步调整。下边是小编用自己的数据在线画的网络图(左图),和用Gephi调整后的结果(右图),是不是还不错~
图形处理软件和使用方法以及Gephi软件和使用方法可扫描文后的二维码添加小编微信获取。

Step 5 写作建议
Network analysis was performed on Tutoolsplatform (http://www.cloudtutu.com), a free online data analysis website.
Network analysis revealing (a) co-occurrence patterns among ARG subtypes and (b) co-occurrence patterns between ARG subtypes and microbial taxa at the genus level. Nodes are colored according to modularity classes. A connection represents a strong (r > 0.8) and significant (P < 0.01) correlation. The size of each node is proportional to the number of connections. (参考文献:Network analysis revealing a co-occurrence patterns among ARG subtypes, Fig. 4)

尊敬的用户,如果图图云平台在您的科研中有幸提供了些许帮助,我们期望您能在方法学或者致谢中提及我们,引用方法如下:XXXX analysis was performed on Tutools platform (http://www.cloudtutu.com), a free online data analysis website. 目前平台还处于测试阶段,使用过程中有任何疑问或者报错欢迎随时联系小编反馈。您的反馈和建议是我们最大的动力~

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