Worthington丨Worthington 磷酸酶,碱性
艾美捷Worthington碱性磷酸酶是一个与碱性pHJ适的非特异性磷酸单酯酶相关的广义术语。
来源/单位定义:
CAP:小腿肠。沃辛顿装置在37°C、pH 9.8下每分钟水解1µmol对硝基苯酚磷酸盐。
BAPF、BAPC、BAPSF:大肠杆菌。在25°C、pH 8.0下,一个单元每分钟水解1µmol对硝基苯酚磷酸盐。
PC:鸡肠。在25°C、pH 8.8下,一个单元每分钟水解1µmol邻羧基苯酚磷酸盐。
技术说明:沃辛顿鸡肠碱性磷酸酶(代码:PC)是用于NF/USP地塞米松磷酸盐测量的制剂。
单位定义:
在37°C,pH 7.5,使用尿素变性血红蛋白作为底物,One Unit释放1微摩尔Folin阳性氨基酸(以酪氨酸计)。
艾美捷Worthington蛋白酶K(PROK)是一种具有广泛作用的丝氨酸内肽酶,从真菌Tritirachium album liber的滤液中分离出来。
正磷酸单酯磷酸水解酶(碱性J佳)
碱性磷酸酶是一个与非特异性磷酸酯酶相关的广义术语,在碱性pH下具有J佳活性。Fernley(1971)对哺乳动物碱性磷酸酶进行了综述。E、 大肠杆菌碱性磷酸酶是从核糖和脱氧核糖寡核苷酸中去除末端单酯化磷酸的有效试剂。里德和威尔逊(1971)对其进行了审查。
艾美捷Worthington鸡肠碱性磷酸酶的特征:
Kunitz(1960)对该酶进行了部分纯化和研究。
J佳pH值:8-9。
该酶被螯合剂和无机磷酸盐抑制。
在2-8°C下稳定至少6-12个月。
小牛肠碱性磷酸酶的特征:
9.8.
等电点:5.7。
Zn、Mg++、Ca++。
特异性:参见Reid和Wilson(1971)的评论。还有Mushak和Coleman(1972)以及Snyder和Wilson(1972)。
该酶是锌金属酶。Schüssler(1968)报道了四种同工酶。Chang和Moog(1972)在鸡十二指肠的酶中发现了三种同工酶。(沃辛顿制剂来自整个肠道。)
分子量:140,000.
J佳pH值:8.0(Garen和Levinthal 1960)。
等电点:pH 4.5(Garen和Levinthal 1960)。
消光系数:E278=7.2(Anderson等人,1975)。
激活器:Schüssler(1968)指出Mg2+的活化。参见Sivanaesan等人(1991)。
抑制剂:酸化至pH4.5可逆地使酶失活。
稳定性:冻干制剂在2-8°C下稳定1-2年。
Bloch和Schlesinger(1974)关于动力学研究的报告。Bock和Sheard(1975)指出,大肠杆菌酶在广泛的pH形成复合物上紧密结合磷酸盐,这些复合物可能是水解作用的中间产物。另见Bosron和Vallee(1975)、Zukin和Hollis(1975)以及Chlebowski和Coleman(1974)。
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