TUNEL

细胞凋亡试剂盒内容及操作步骤

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凋亡细胞的原位末断转移酶标记法

(TUNEL

细胞凋亡的多步骤机制作用的最终环节是

;

细胞内源性核酸内切酶的激活而导

致核染色质

DNA

双链

的断裂。

大量

DNA

片段暴露出的

3

羟基在末断转移酶

(terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT

DNA

聚酶的作用下

,

与生物素或地

高辛标记的核苷酸结合

,

最终借助与卵白素或抗地高辛抗体结合的荧光素或

HRP ,

使

凋亡细胞被特异性地标记和显示出来。

TUNEL

细胞凋亡试剂盒由美国罗氏公司提供

试剂

1:

酶浓缩溶液

(Enzyme Solution

试剂

2:

标记溶液

(Lable Solution

试剂

3:

转化剂

-POD (Converter-POD

酶标记抗荧光素抗体

(

即用型

试验所需其它试剂

:

非石蜡切片

:

·

冲洗缓冲液

:

磷酸盐缓冲液

(PBS

·

阻断溶液

:0.3%H2O2

甲醇溶液

·

固定溶液

:4%

多聚甲醛

(

溶剂

pH7.4

新鲜配制的

PBS

溶液

·

渗透液

:0.1%Triton

-100(

溶于新鲜配制的

0.1%

枸橼酸钠溶液

Triton X-100(

聚乙二醇辛基苯基醚

:

曲拉通

X-100,

乳化剂

OP

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