分子克隆基础：什么是质粒

终于可以开开心心地做实验了呢~~于是来写写最近的分子克隆经验总结。

记得刚踏进生物分子领域之时，我那德高望重的教授曾郑重要求我们必须首先学会的三个技能：1.分子克隆，2.养细胞，3.Western blot（蛋白印记）。只要这三个东西齐活了那基本可以运转起一个生化实验室了。这三个技术非常难以精通，非常需要经验积累，只要精通了，那其他的实验上手更是指日可待。我自评的话，就只能说western blot还稍微跑的可以（笑），其他两个真是一塌糊涂。

三个技能之中基础的基础就是今天要写的分子克隆：分子，顾名思义就是DNA分子，克隆，顾名思义就是获得很多个这个分子的拷贝。翻译过来就是将你感兴趣的DNA分子纯化出来并扩增的方法。学会了分子克隆，你就会觉得自己拥有一双上帝之手，跨物种遗传当然没问题，再结合一系列的基因编辑基因技术，你想要改造寄主细胞，怎么表达一个基因，表达多久，表达的量多少，加什么标签，发个绿光还是发个红光，要不要整合到细胞的基因组上，都能自由发挥！

用体外重组方法将目的基因插入克隆载体，形成重组克隆载体，然后才能通过转化与转导的方式，引入适合的寄主体内得到复制与扩增[1]。

简易的分子克隆的连接流程

一. 什么是质粒

首先我们要介绍的就是分子克隆的重要载体，质粒（plasmid）。质粒通常被定义为圆形的、双链的染色体外DNA。我们知道，每个细胞都有一个细胞核或核区域，包含了细胞的所有遗传物质。但原核细胞，和一些真核细胞，拥有额外的DNA，从他们的核区域的DNA分离。这个额外的DNA被称为质粒。它是双股的，通常是圆形的，这意味着它连接在一起形成一个圆。

一个细菌的DNA和质粒

根据功能不同将质粒分为5种不同类型的育性质粒、抗性质粒、col质粒、毒力质粒和代谢或降解质粒。

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