艾美捷 MITO-ID®线粒体膜电位细胞毒性试剂盒利用阳离子双发射染料测量线粒体膜电位(MMP)的波动,该染料在细胞质中以绿色荧光单体存在,并在线粒体中累积为橙色荧光J-聚集体。具有低膜电位的线粒体将积聚低浓度的染料,并显示绿色荧光,而更高J化的线粒体将显示橙红色荧光。随着线粒体功能日益受损,细胞呈现出从橙色到绿色荧光的转变。该试剂盒是一种独特的HTS分析方法,可实时监测线粒体膜电位,无需清洗或去除培养基。

艾美捷 MITO-ID®线粒体膜电位细胞毒性试剂盒作用机制:

染料的基本化学结构由高度共轭的部分组成,这些部分广泛地去定域化正电荷,从而允许电泳吸收到J化线粒体内膜的负电荷基质相。染料能够选择性地进入线粒体,随着膜电位的增加,其颜色可逆地从绿色变为橙色(双发射电位探针)。这种光物理性质是由于膜J化时J-聚集体的可逆形成,当在490 nm激发时,会导致发射光从~530nm(单体染料的发射)移动到590 nm(J-聚集体形式的发射)。因此,具有低膜电位的线粒体将积累低浓度的染料,并显示绿色荧光,而更高J化的线粒体将显示橙色荧光。

艾美捷MITO-ID®线粒体膜电位细胞毒性试剂盒是CELLESTIAL®试剂和分析试剂盒的成员,包括荧光分子探针,已在活细胞分析应用中进行了广泛的基准测试。CELLESTIAL®试剂和试剂盒适合用于要求严格的成像应用,如共聚焦显微镜、流式细胞术和HCS,其中要求一致性和再现性。

文献参考:

FUNDC1 regulates receptor-mediated mitophagy independently of the PINK1/Parkin-dependent pathway in rotenone-treated SH-SY5Y cells: S.Y. Park, et al.; Food Chem. Toxicol. 137, 111163 (2020), Application(s): Fluorescence microscopy and microplate reader, Abstract;

Inhibitory role of TRIP-Br1/XIAP in necroptosis under nutrient/serum starvation: Z. Sandag, et al.; Mol. Cells 43, 236 (2020), Abstract; Full Text

NAD hydrolysis by the tuberculosis necrotizing toxin induces lethal oxidative stress in macrophages: D. Pajuelo, et al.; Cell. Microbiol. 22, e13115 (2020), Application(s): THP-1 macrophages; microplate reader, Abstract; Full Text

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