1. makeblastdb出错

你可能makeblastdb频繁报错,说是出现重复条目……
如果使用的是NCBI来源的nt.fa,请不要添加-hash_index这个参数。

2. 创建好的数据库不能使用

blastn或者blastp报了DB相关的错,网上有人提示你blastn和makeblastdb的版本不兼容。
如果你是通过conda安装的blast,那么恭喜你,你中了另一个天坑。赶紧删除这个conda环境,去NCBI的FTP服务器上下载个即开即用的ncbi-blast-版本号±x64-linux.tar.gz。conda的包有问题。

3. makeblastdb出来的数据库跑哪去了?

先cd到你想要保存的目录,然后再makeblastdb.

4. blastn或者blastp明明在命令行能运行,但是写在shell脚本里就报错offending value?

shell脚本的老问题,碰到写得稀碎的blast,就会爆炸。推荐使用python的subprocess.Popen,利用这个包传递命令不会报错,保证 -evalue 1e-6这种参数不会别识别为其他的。
网上论坛各种人让你检查是否输入的en dash还是em dash…… 没用,别耽误时间。

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