293细胞系是从原代胚胎人类肾脏中建立的永久性细胞系人类腺病毒5型DNA。腺病毒E1区(E1a和E1b)编码的基因是在这些细胞中表达,并参与病毒启动子的反式激活,使这些细胞产生高水平的蛋白质。E1还补充了重组腺病毒载体中的E1缺失,允许病毒复制。我们的293/Cas9细胞系稳定表达Cas9和嘌呤霉素抗性基因。利用逆转录病毒将Cas9和嘌呤霉素抗性基因导入亲代293细胞。

图:293/Cas9细胞系表达Cas9蛋白。293个细胞或293/Cas9细胞用RIPA缓冲液,并使用Cell Biolab的Cas9 ELISA试剂盒(Cat#PRB-5079)检测Cas9蛋白水平。

Cell Biolabs艾美捷293细胞系培养方法:

从冷冻细胞建立293/Cas9培养基:

1.将10毫升完整的DMEM生长培养基放入50毫升锥形管中。解冻冷冻的食物在37°C水浴中轻轻搅拌,在1-2分钟内冷冻细胞。净化空气用70%(v/v)乙醇擦拭冷冻瓶表面。

2.将解冻的细胞悬浮液转移到含有10mL生长培养基的锥形管中。

3.在室温下以1000 rpm的转速离心5分钟,收集细胞。移除通过抽吸培养基。

4.轻轻移液,将细胞重新放入锥形管中的15毫升新鲜生长培养基中然后倒下。

5.将15毫升细胞悬浮液转移到T-75组织培养瓶中。将电池置于37°C的环境中培养箱中的二氧化碳浓度为5%。

6.每天监测细胞密度。细胞应在培养物达到95%汇合时传代。

Cell Biolabs:细胞学试剂品牌,为生物技术和研究类客户提供基于细胞功能研究以及疾病等方面的技术和服务。主要涵盖细胞研究、细胞信号通路和蛋白质生物学、代谢研究、病原体和毒素、干细胞研究等领域。

Cell Biolabs 相关研究方案:

1.CBA-100:细胞选择™ 24孔细胞迁移试验(波顿室试验,比色法)

2.CBA-106:细胞选择™ 96孔细胞迁移试验(Boyden小室试验,荧光法)

3.CBA-110:细胞选择™ 24孔细胞侵袭试验(波顿室试验,比色法)

4.CBA-120:细胞选择™ 24孔伤口愈合试验

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