HPLC工作原理及仪器组成

高效液相色谱法（HPLC）是一种用于分离、鉴定和量化混合物中的各组分的分析技术，利用色谱柱对混合物进行分离，然后用光谱法进行鉴定和定量。在20世纪60年代，采用低压玻璃柱的柱色谱LC进一步发展为采用高压金属柱的高效液相色谱HPLC。因此，高效液相色谱法基本上是一种高度改进的柱液相色谱法。溶剂不是在重力作用下通过色谱柱，而是利用高达400个大气压的输液泵送入色谱柱。

HPLC工作原理

混合物各组分通过与固定相、流动相之间的相互作用，在色谱柱中进行分离纯化；

固定相是存在于色谱柱中一种非常小的多孔颗粒材料，流动相是在高压迫使下通过色谱柱的一种溶剂或混合溶剂。用注射器注入样品，通过一个连接样品回路的阀门，使样品与流动相混合，随后样品中各组分以不同的速率通过色谱柱，由于各组分与固定相之间的吸附能力不同，各组分依次流出色谱柱，通过合适的检测器将组分浓度转换成电信号传递到计算机的HPLC软件上。运行结束后，在HPLC软件中就可以得到色谱图。

HPLC仪器组成

HPLC工作原理及仪器组成（图片来源：迪信泰检测平台）

（1）高压泵

HPLC的发展带动了泵系统的发展。泵是液相色谱系统中最重要的组成部分，主要是将流动相从溶剂贮存器送入液相系统中，并在高压下保持流量和压力的稳定。目前LC系统中使用的大多数泵都是通过电动活塞的往复运动来产生流量的（往复泵）。由于活塞的运动可以产生“脉冲”。

（2）进样器

进样器位于泵的旁边。最简单的方法是使用注射器将样品注入液相系统。现在一般都使用六通进样阀和自动进样器。其中，自动进样器可以在设定的时间内重复进样。

（3）色谱柱

色谱柱主要是用来分离混合物中各组分。目前常用的是不锈钢外壳的柱子，而不是玻璃柱。通常使用的填料是二氧化硅或聚合物凝胶。用于液相色谱LC的洗脱液有酸性或碱性的，由于不锈钢对多种溶剂具有耐受性，因此大多数柱壳由不锈钢制成。

（4）检测器

检测器是将色谱柱分离出来的各组分检测出来。当待测物不存在时，洗脱液的成分是一致的，而加入待测物可以改变洗脱液的组成，检测器就可以测量这种差异，并转换成电信号传递给记录仪。检测器有多种，如紫外可见光检测器、荧光检测器、电化学检测器等等。大家可根据具体的分析对象，选择合适的检测器，可参考迪信泰检测平台的<涨知识>如何选择HPLC检测器这篇文章。

（5）数据记录仪
检测器检测到的洗脱液的变化是以电信号的形式呈现的，因此我们的眼睛是看不到，需要借助计算机的数据处理器（积分器）。数据处理器有多种类型，如一个简单的由内置打印机和文字处理器组成的系统，或带有专门为LC系统设计的软件系统，这种系统不仅具有数据采集功能，还具有峰值拟合、基线校正、自动浓度计算、分子量测定等功能。

（6）脱气机

HPLC系统中可能存在一些肉眼看不见的气体，会导致噪音增大，基线不稳定等现象。脱气机使用特殊的聚合物膜管来去除气体，聚合物膜管表面的很多非常小的孔允许空气通过，同时可以阻止任何液体通过。

（7）柱温箱

液相色谱分离通常受柱温的影响很大。为了获得一致的结果，保持温度一致是很重要的。对于某些分析，例如糖和有机酸，在50～80°C下可以获得更好的结果。因此，色谱柱通常放在柱形加热器中。

本文由迪信泰检测平台整理编辑，未经许可，不得转载。

迪信泰检测平台基于高效液相色谱结合以下检测器，提供专业、高效的HPLC检测服务，快速分析大批量样品。

(1)紫外可见分光检测器(UVD)

(2)双光路双流路紫外/荧光检测器(UV/FLD-1)

(3)蒸发光散射检测器(ELSD)

(4)液相色谱-液相色谱联用(HPLC-HPLC)

参考资料：Sagar Aryal. High-Performance Liquid Chromatography (HPLC).

HPLC工作原理及仪器组成相关推荐

GPRS的工作原理、主要特点
GPRS的工作原理.主要特点: 引言近年来,通信技术和网络技术的迅速发展,特别是无线通信技术的发展,使得电力系统的自动化程度进一步提高.GSM网络出现后,技术人员很快把GSM模块嵌入到各种仪表仪器 ...
otg usb 定位_详解USB OTG工作原理及其应用
原标题:详解USB OTG工作原理及其应用 1994年,Intel,Compaq等七家软硬件全球知名企业为了突破当时PC使用串口和并口传输速度的限制,成立了通用串行开发者论坛( Implemente ...
icp光谱仪的工作原理_ICP2060T ICP光谱仪
产品说明.技术参数及配置1.主要配置及附件: 以光电倍增管PMT检测器为基础的单道扫描电感耦合等离子体发射光谱仪,高频发生器,自动调谐,提供具有中英文操作界面的软件: 专用自动温控循环冷却水系统: 氩 ...
永磁交流伺服电机的工作原理与更换新编码器后的常规零位校正方法
http://wuhuotun.blog.163.com/blog/static/73085450200910655748516/ 永磁交流伺服电机的编码器相位为何要与转子磁极相位对齐其唯一目的就是 ...
verilog设计简易正弦波信号发生器_信号发生器工作原理是什么
信号发生器是指产生所需参数的电气测试信号的仪器.根据信号波形可分为四类:正弦信号.函数(波形)信号.脉冲信号和随机信号发生器.那么信号发生器工作原理是什么?听听广州荣鑫电子怎么说. 信号发生器又称信号 ...
自动控制原理第二版王建辉_气箱脉冲布袋除尘器的工作原理
气箱脉冲布袋除尘器正以其卓越的性能服务于铸造.冶金.机械.电力.建材.矿山.水泥.化工等各行各业,为消除粉尘污染,维护企业形象,保护环境正日益发挥其独特的作用.滤料依据粉尘的特性可选用不同类型的针刺毡 ...
1流式细胞术荧光比值计算_浅谈流式细胞仪的工作原理和应用
流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)是七十年代发展起来的一项高科学技术,80年代开始从基础研究发展到临床医学研究及疾病的诊断和治疗监测,我国在80年代初引进了第一台流式细胞仪. 它集光 ...
diy无感无刷电机霍尔安装_从工作原理来了解意大利Brusatori无刷电机
2020年12月16日 15:39 来源: 东莞索菲特自动化设备有限公司 >>进入该公司展台意大利Brusatori无刷电机工作原理介绍如下: 无刷直流电动机是采用半导体开关器 ...
lede旁路由作用_高频旁路电容器作用及工作原理
在电子仪器中,从某一装置输出的交变电流经常有高频成分与低频成分(比如音频的高音信号与低音信号).这时,高频旁路电容器就能起到滤过高频(让高频通过高频旁路电容器所在支路)保留低频(低频输出)的作用了.起 ...

HPLC工作原理及仪器组成

HPLC工作原理及仪器组成相关推荐

最新文章

热门文章