CN04 的活性位点基于细菌细胞毒性坏死因子 (CNF) 毒素的催化结构域。催化结构域共价连接到专有的细胞穿透部分。CN04 通过将 Rho 的 glutamine-63 和 Rac 和 Cdc42 的 glutamine-61 在其各自的 Switch II 区域中脱酰胺直接激活 Rho GTPase 异构体 (1,2)。这种修饰将 glutamine-63 转化为谷氨酸,从而阻断内在和 GAP 刺激的 GTPase 活性,从而产生组成型活性的内源性 Rho、Rac 和 Cdc42 (3)。CN04 在加入培养基后 2-4 小时内显着增加 GTP 结合的 RhoA、Rac1 和 Cdc42 的水平。

Cytoskeleton艾美捷Rho/Rac/Cdc42 激活剂 I用途包括:

1.控制 Rho、Rac 和 Cdc42 通路激活

2.研究 Rho 家族小 G 蛋白激活对其他信号通路的影响

3.研究 Rho、Rac 和 Cdc42 信号通路之间的细胞类型特异性串扰

4.研究 Rho 家族小 G 蛋白激活对肌动蛋白细胞骨架重排的影响

Cytoskeleton 艾美捷该激活剂相关问题:

问题 1:直接 Rho/Rac/Cdc42 激活剂 CN04 能否用于培养中生长的细胞?

回答 1:  是的,CN04 专门设计用于培养细胞的 Rho/Rac/Cdc42 激活剂。CN04 的活性位点基于细菌细胞毒性坏死因子 (CNF) 毒素的催化结构域。CN04 的催化结构域与专有的细胞穿透部分共价连接。进入细胞后,CN04 通过将 Rho 的 63 谷氨酰胺和 Rac 和 Cdc42 的谷氨酰胺 61 在它们各自的 Switch II 区域中脱酰胺直接激活 Rho GTPase 异构体。这种修饰将 glutamine-63 转化为谷氨酸,从而阻断内在和 GAP 刺激的 GTPase 活性,从而产生组成型活性的内源性 Rho、Rac 和 Cdc42。CN04 在加入培养基后 2-4 小时内显着增加 GTP 结合的 RhoA、Rac1 和 Cdc42 的水平。

问题 2:如何评估 CN04 处理后我的细胞中的 Rho、Rac 和/或 Cdc42 活性是否发生变化?

答案 2:  有多种方法可以测量 Rho、Rac 和 Cdc42 活性的变化。为了可视化由 Rho 家族蛋白介导的细胞细胞骨架的变化,我们建议使用荧光标记的鬼笔环肽(Cat.# PHDG1、PHDH1、PHDN1、PHDR1)检查应力纤维的形成和边缘起皱。这些 Acti-stain 鬼笔环肽标记含 F-肌动蛋白的结构和纤维。Rho 家族蛋白的激活可以通过我们的下拉或 G-LISA 激活分析直接量化。对于 RhoA,使用 BK036 下拉或 BK 124 G-LISA。对于 Rac1,使用 BK035 下拉或 BK128 G-LISA。对于 Cdc42,使用 BK034 下拉或 BK127 G-LISA。

Cytoskeleton相关研究工具:

GTPgammaS:不可水解 GTP 类似物:100x 库存 BS01

Rac/Cdc42 激活剂 II CN02

Rho 激活剂 I CN01

Rho 激活剂 II CN03

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