细胞冻存及细胞计数的技巧

成功冻存细胞和复苏细胞是细胞培养研究的两个重要方面，细胞本身的特性和细胞低温储藏时防止冰晶形成是维持细胞活力的关键。

1.冻存“年轻力壮”的细胞

为保证细胞在复苏后，有良好的增殖能力，建议冻存传代三代以内的细胞。俗话说得好，年轻人的恢复能力是杠杠滴！细胞亦是如此~

2.在冻存之前一定要先了解清楚该细胞的增殖呢李并冻存适当数量的细胞

每种细胞的增殖能力各不相同，知己知彼才能百战不殆。如果增殖能力不高，可以在冻存细胞时，用10%-90%的血清（多数常见细胞株可用20%）维护细胞活力，并且提高每份冻存的细胞数量。

通常，冻存液中细胞的最终密度为5×106/mL～1×107/mL。如同美食和闺蜜使我心宽体胖，细胞也需要充足的营养和同伴的互相扶持才能茁壮成长。

3.细胞冻存一定要缓慢降温

DMSO可保护细胞免受冰晶导致的机械损伤，一般用培养液配制10% DMSO作为冻存液。

但是如果降温迅速，即使有DMSO的保护，也可能会产生少量冰晶损伤细胞。

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