qiime2 学习 测序公司返回合并后的数据后续处理
参考:Alternative methods of read-joining in QIIME 2
将样品送去测序公司进行双端测序后,测序公司返还的是去掉barcodes、primers,合并好后的测序数据的处理方式:
qiime tools import \--input-path fj-joined/manifest \--output-path fj-joined-demux.qza \--type SampleData[JoinedSequencesWithQuality] \ 注意类型:SampleDate[JoinedSequencesWithQuality]--input-format SingleEndFastqManifestPhred33 按单端数据格式:SingleEndFastqManifestPhred33
qiime demux summarize \--i-data fj-joined-demux.qza \--o-visualization fj-joined-demux.qzv 根据plot图来确定碱基切割位点
后续处理:Deblur
质量控制
qiime quality-filter q-score-joined \ --i-demux fj-joined-demux.qza \ --o-filtered-sequences fj-joined-demux.qza.qza \ --o-filter-stats fj-joined-demux.qza-stats.qza
Deblur处理
qiime deblur denoise-16S \--i-demultiplexed-seqs demux-joined-filtered.qza \--p-trim-length 250 \--p-sample-stats \--o-representative-sequences rep-seqs.qza \--o-table table.qza \--o-stats deblur-stats.qza
qiime feature-table summarize \--i-table table.qza \--o-visualization table.qzv
qiime feature-table summarize \--i-table table.qza \--o-visualization table.qzv \ --m-sample-metadata-file sample-metadata.tsvqiime feature-table tabulate-seqs \--i-data rep-seqs.qza \--o-visualization rep-seqs.qzv
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