Jackson Western印迹检测分析物丨比色免疫印迹

前言：

比色检测是一种经济、简便的Western印迹检测分析物的方法。与二抗偶联的酶报告基因与显色底物发生反应，产生视觉上可检测的信号，从而直接在印迹膜上识别目的蛋白的存在。

这期的主题是Jackson ImmunoResearch公司为大家讲解：Western Blot、IHC 和 ELISA 的显色检测。

具有比色检测的蛋白质印迹使用与酶报告分子偶联的二抗，该酶报告分子催化可溶性显色底物转化为有色不溶性产物。该产物沉淀在印迹膜上，产生肉眼可见的彩色条带，从而识别出感兴趣的蛋白质。

图 1：间接比色检测。A. 酶联二抗与目的蛋白的一抗结合。B. 将底物添加到抗体-抗原复合物中。C. 酶与底物反应，形成可检测的有色产物。

一、Jackson公司：开发印迹很简单

将膜与显色底物一起温育，直到产生所需水平的信号，然后简单地将底物洗掉。这会停止酶促反应并阻止印迹进一步发展。比色检测操作简单快捷，与化学发光或荧光系统相比，为优化提供了更大的灵活性。然而，固定的沉淀物不利于膜的剥离和重新探测，使得使用额外抗体的多次探测不可靠。

比色 Western blotting 可以具有高灵敏度，但长时间孵育会导致背景信号增加，这可能会掩盖来自感兴趣蛋白质的信号。因此，比色检测可能不适用于低丰度蛋白质。然而，当已知蛋白质丰富或方法已优化时，简单性和低成本使得比色检测具有吸引力。有多种底物可用，它们会产生一系列有色沉淀物，每种都提供不同的灵敏度。

图 2：比色西方印迹。通过 SDS-PAGE 分离还原的和 SDS 变性的小鼠 IgG 的重链 (HC 50 kDa) 和轻链 (LC 25 kDa)，并使用过氧化物酶-山羊抗小鼠 IgG (H+L) 在蛋白质印迹上检测并用 TMB 可视化显色底物。

Jackson Western印迹检测分析物丨比色免疫印迹相关推荐

Rockland检测开发丨Rockland 免疫分析开发方案
艾美捷 Rockland定制免疫分析包括开发.鉴定.验证和实施基于蛋白质印迹和 ELISA 的分析--包括细胞内西方和基于细胞的 ELISA--支持从发现研究和临床前研究到生物过程监控和批放行测试等. ...
Jackson ImmunoResearch 荧光免疫印迹的优势和荧光团分展示
Jackson公司荧光免疫印迹前言: 荧光蛋白质印迹可以为已经很强大的蛋白质检测技术提供许多优势.二抗与荧光染料(如 Alexa Fluor ® )偶联, 产生可使用数字成像仪检测的信号.该技术灵敏度 ...
Jackson 化学发光免疫印迹解决方案
前言: 化学发光蛋白质印迹法是一种高灵敏度的蛋白质检测方法.宽动态范围允许在很宽的蛋白质浓度范围内进行分析物检测.报告酶的线性响应与增强的化学发光 (ECL) 底物相结合,使检测方法适用于定量分析. ...
WB实验（免疫印迹实验）
文章目录前言实验流程实验周期及交付结果形式部分实验结果展示前言如期生物公众号同名,分享实验干货和生信技能,关注领取资料技能包蛋白质印迹法(免疫印迹实验)即Western Blot.它是 ...
蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB )实验检测服务
简介广州如期生物有限公司提供WB蛋白质印迹法(Western blot)检测服务.蛋白质印迹法是一种用于识别特定蛋白质的生物技术.这种技术通常用于研究蛋白质的表达水平,以及蛋白质的组学研究和生物学研 ...
Jackson纳米二级抗体研究丨艾美捷VHH片段羊驼抗人IgG（H+L）
Jackson ImmunoResearch 艾美捷Nano Secondaries是在羊驼中产生的多克隆VHH片段抗体(纳米体).它们对人.兔或鼠有特异性.<15kDa VHH片段抗体比传统的 ...
艾美捷ProSci丨ProSci 免疫检查点研究试剂
什么是免疫检查点? 免疫检查点是充当 T 细胞受体 (TCR) 共信号伙伴的蛋白质,可向 T 淋巴细胞传递正信号或负信号.在正常情况下,这些蛋白对自身耐受至关重要,但在肿瘤中,这些免疫检查点蛋白可以让 ...
小分子蛋白Western blot 检测
实验概要 1.目的检测小分子蛋白抗体 2.适用范围单克隆抗体和多克隆抗体实验原理将经电泳分离的抗原转印到膜上作为固相,利用酶标记的抗抗体以检测已与固相抗原结合的受检抗体主要试剂试剂配制 ...
一氧化氮（NO）含量检测试剂盒丨Abbkine详细说明书
一氧化氮(NO)是一种反应性自由基,在神经传递.免疫反应.细胞凋亡等重要生理功能中发挥重要作用.NO是由L-精氨酸经NO合酶(NOS)合成的,已被鉴定为内皮源性舒张因子(EDRF)和抗血小板物质.它是 ...

Jackson Western印迹检测分析物丨比色免疫印迹

Jackson Western印迹检测分析物丨比色免疫印迹相关推荐

最新文章

热门文章