MITO-ID 线粒体膜电位检测试剂盒的作用机制和应用

评估线粒体功能状态的基于细胞的检测方法正在成为阐明线粒体活动在药物诱导的细胞毒性、细胞凋亡级联和其他细胞和生化过程中的作用的有用工具。线粒体膜电位（MMP）的丧失往往与细胞凋亡的早期阶段有关。MMP的崩溃与线粒体通透性转换孔的打开相吻合，导致细胞色素C释放到细胞质中，这反过来又触发了凋亡级联中的其他下游事件。

Enzo Life Sciences 艾美捷MITO-ID系列线粒体膜电位检测试剂盒——用一种阳离子染料测量线粒体膜电位，根据膜电位状态发出绿色或橙色的荧光。在有能量的细胞（膜电位较高）中，染料在细胞质中以绿色荧光单体存在，同时在线粒体中以橙色荧光聚集体的形式聚集。然而，在线粒体膜电位受损的细胞（膜电位较低）中，染料主要以绿色荧光单体存在于整个细胞质中，在线粒体中不再表现出橙色荧光。

Enzo Life Sciences 艾美捷MITO-ID 线粒体膜电位检测试剂盒特点：

比JC-1荧光染料灵敏10倍，水溶性好；

耐光双发射染料；

无需漂洗/换液过程；

单独的MITO-lD测定可用于检测线粒体质量；

在较低的药物/剂量浓度下检测细胞毒性；

没有像JC-1配方那样的溶剂伪影。

Enzo Life Sciences 艾美捷MITO-ID 线粒体膜电位检测试剂盒作用机制：

该染料的基本化学结构由高度共轭的部分组成，使正电荷广泛离域，从而允许电泳吸收到J化的线粒体内膜的带负电荷的基质相。该染料能够选择性地进入线粒体，当膜电位增加时，它的颜色会从绿色可逆地变为橙色（双发射电位探针）。这种光物理特性是由于在膜J化时可逆地形成J-聚集体，导致在490nm处激发时，发射光从～530nm（单体染料的发射）转移到590nm（J-聚集体形式的发射）。因此，具有低膜电位的线粒体将积累低浓度的染料，并表现出绿色荧光，而更高J化的线粒体将表现出橙色的荧光。

Enzo Life Sciences 艾美捷MITO-ID 线粒体膜电位检测试剂盒的应用：

左图：HeLa细胞的线粒体用 MITO-ID 膜电位染料染色，并通过落射荧光显微镜观察。橙色荧光聚集体定位于线粒体（橙色通道），而绿色荧光单体主要染色细胞质（FITC通道）。

右图：对照组和处理组细胞的流式细胞术分析。Jurkat细胞未经处理（左），用1μM CCCP处理15分钟（右）。然后用MITO-ID 膜电位染料对细胞进行染色，并在FACS Calibur仪器上运行。

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