宏转录组研究成果荣登10分JHM
近期,派森诺与华东师范大学合作,在知名期刊《Journal of Hazardous Materials》上发表论文,通过宏转录组学研究,解析了餐厨垃圾和污泥厌氧共消化处理系统中,抗生素暴露对功能微生物物质代谢和产甲烷活性的影响,并揭示了抗生素暴露抑制厌氧消化过程的微生物作用机制。
研究背景
餐厨垃圾和污泥厌氧共消化处理系统是一种高效且极具潜力的有机固废资源化利用技术。但污泥中的抗生素残留也会进入到厌氧消化系统中,而关于抗生素对消化过程中功能微生物和代谢通路的作用机制尚缺乏研究。
本研究利用高通量测序技术,解析厌氧消化过程中的微生物群落结构,并通过宏转录组水平的研究,揭示微生物活性和代谢通路表达的变化规律,以评估抗生素暴露对厌氧性能的影响及其作用机制。
材料与方法
测序技术:Illumina MiSeq + HiSeq高通量测序平台
测序模式:细菌群落16S rRNA基因V3-V4区、古菌群落V4-V5区测序;宏转录组测序
实验对象:抗生素暴露条件下的餐厨垃圾和污泥厌氧共消化过程
研究结果
- 抗生素对厌氧消化过程中甲烷产量的影响
抗生素(磺胺甲恶唑和红霉素)对甲烷产量具有抑制作用(抑制率为5.29 ~ 10.16%),且随着浓度的增加,其抑制作用增强。
图1 抗生素暴露对甲烷产量的影响
- 抗生素暴露对厌氧消化过程中可溶性化学需氧量(SCOD)、可溶性多糖(SPN)、可溶性蛋白(SPS)和挥发性脂肪酸(VFAs)的影响
实验显示,产甲烷高峰期(第23天),CK组中的SCOD和SPN的浓度均显著低于抗生素暴露组,这表明在抗生素的压力下,微生物对有机物的利用率下降,抑制了微生物的水解活性。
图2 抗生素暴露对厌氧消化过程中 (a) SCOD, (b) SPN和 © SPS的影响
VFAs的产生是厌氧消化酸化过程的主要特征,其中又以乙酸最为关键,因为它与甲烷生成直接相关。结果显示,产甲烷高峰期(第23天),CK组中乙酸含量最低,表明抗生素会降低乙酸的利用效率,从而抑制酸化过程。
图3 抗生素暴露对厌氧消化过程中挥发性脂肪酸(VFAs)的影响
- 16S多样性组成谱分析:抗生素暴露对厌氧消化过程中微生物群落的影响
产甲烷高峰期(第23天),反应器中的Fastidiosipila和Proteiniphilum丰度降低,这两种微生物有助于乙酸生成,这表明,抗生素抑制了乙酸的生成过程。且与CK组相比,四环素和红霉素添加组中Methanosaeta(产甲烷菌)丰度降低,所有抗生素添加组的氢营养型产甲烷菌属丰度均有所下降,这表明抗生素压力下产氢过程受到抑制,进而抑制了产甲烷过程。
图4 抗生素暴露对厌氧消化过程中优势细菌 (a) 和古菌 (b) 的影响
- 宏转录组学分析:抗生素暴露下微生物代谢途径和群落表达变化
宏转录组测序分析表明,抗生素暴露下,各处理组甲烷代谢均有所抑制,表明抗生素确实会抑制甲烷代谢的功能活性。同时,抗生素暴露还抑制了关键有机物代谢(氨基酸代谢、脂质代谢)和能量代谢相关的活性,导致产甲烷关键辅酶的生物合成活性和VFAs的产生受到抑制。产甲烷过程中的主要产甲烷菌是Methanosarcina、Methanobacterium等;但抗生素处理抑制了Methanobacterium和Methanoculleus的活性。四环素和磺胺甲恶唑也同时抑制了参与直接种间电子转移途径的Geobacter的活性,从而降低了电子传递效率,间接抑制了甲烷产生。
图5 宏转录组学研究揭示抗生素暴露下微生物群落的代谢途径和基因表达变化
图6 抗生素暴露下甲烷代谢途径的表达和丰度变化
总结
本研究采用宏转录组技术阐明了抗生素抑制餐厨和污泥共消化过程的微生物机制。在抗生素暴露的厌氧消化过程中,产乙酸菌属Proteiniphilum和产甲烷古菌属Methanobacterium丰度下降,水解过程受抑制,延缓了产甲烷过程。同时,抗生素抑制了关键有机物代谢和能量代谢的活性,导致产甲烷关键辅酶(辅酶B/M/F420和甲烷呋喃)的生物合成活性受到抑制,最终抑制了产甲烷代谢活性。
这些结果与物质代谢和甲烷产量相一致。该研究成果拓展了抗生素抑制有机固废产甲烷的认识。
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