细胞凋亡(apoptosis)是一种基本生物学现象,指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡,在多细胞生物去除不需要的或异常的细胞中起着必要的作用。在正常活细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)位于细胞膜的内侧,而在细胞凋亡的早期,PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。膜联蛋白V(Annexin V) 是一种分子量为35~36KDa的钙离子依赖型磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力特异性结合。通过荧光素或者生物素标记Annexin V即可简单快速地直接检测出细胞早期凋亡情况。 碘化丙啶(propidine iodide,PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,而早期凋亡细胞的细胞膜是完好的,对PI有拒染性。但在凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能透过细胞膜而使细胞核染上。因此将Annexin V 与PI 匹配使用,就可以将凋亡早晚期的细胞以及死细胞区分开来。PI可以被488,532或546nm激光线激发,并发出红色荧光。

实验建议:

Abbkine Annexin V-AbFluor™ 488 细胞凋亡检测试剂盒(绿色荧光)含有Abbkine专有的AbFluor™ 488 绿色荧光染料标记的Annexin V,可通过流式细胞仪或荧光显微镜对凋亡细胞进行鉴定和定量。

AbFluor 488 细胞凋亡检测试剂盒组分:

• Annexin V 结合缓冲液(5x)

• Annexin V- AbFluor™ 488

• Propidium Iodide (PI)

AbFluor 488 细胞凋亡检测试剂盒优势:

• Abbkine AbFluor™ 488 是FITC的优质替代物,不仅荧光强度和光稳定性更好,而且不受pH的影响

• Annexin V- AbFluor™ 488: Ex/Em = 491/517 nm; PI: Ex/Em = 535/617 nm (DNA染料)

• 适用于流式细胞术和荧光显微镜

AbFluor 488 细胞凋亡检测试剂盒实例展示:

图:喜树碱诱导Hela细胞24小时,Annexin V-AbFluor染色™ 488细胞凋亡检测试剂盒。细胞是具有膜联蛋白V-AbFluor的晚期凋亡/坏死细胞™ 488和PI染色(绿色膜,红色碎片核)。

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