【评测】MP SARS-CoV-2单抗、重组蛋白
截至目前,已知引起人致病的冠状病毒包括7种,其中HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63和HCoV-HKU1致病性较低,一般引起轻微的呼吸道症状。基因测序结果显示,SARS-CoV-2与SARS-CoV的同源性约79%,与MERS-CoV的同源性约50%。文献报道,新型冠状病毒S蛋白ACE2亲和力较SARS-COV强,提示具有更强的传染性。
到目前为止,还没有专门用于预防的疫苗和治疗冠状病毒的特效药物。一般采用非特异性治疗,预防严重的并发症,降低重症发病率和死亡率,提高治愈率。研发新型冠状病毒病的疫苗和特异治疗药物成为全球应急科研攻关的重要任务。
SARS-CoV-2感染恢复者体内存在抗病毒多克隆抗体,可中和病毒并阻止新一轮的感染,血浆可用于重症治疗。不足之处:献浆来源有限,难以大规模制备,批间差异等;是否存在抗体依赖的增强作用(ADE效应)还有争议。相比血浆,单克隆抗体(mAb)为单一B淋巴细胞分泌,成分单一明确,可规模化制备,副作用小,且已成功用于治疗多种传染性疾病。
01SARS-CoV-2结构和致病机制
SARS-CoV-2属冠状病毒科(Coro-naviridae)冠状病毒属(Coronavirus),粒子直径约100nm,是一类有包膜的单股正链RNA病毒。基因组全长为30kb,依次由5'-端非编码区、非结构蛋白开放阅读框(ORF)1a/b编码区、刺突糖蛋白S编码区、包膜蛋白E编码区、膜蛋白M蛋白编码区、核衣壳蛋白N蛋白编码区及3'-端非编码区组成。
新冠病毒SARS-CoV-2基本结构
其中,非结构蛋白ORF1a/b区编码的聚蛋白可被切割,形成RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)等,指导病毒基因组复制、转录和翻译。M蛋白和E蛋白参与病毒包膜的形成,而N蛋白则参与病毒的装配。
结构蛋白S可特异性地与宿主细胞的受体结合,是病毒入侵宿主易感细胞的关键蛋白。Spike蛋白含有两个亚基,S1和S2。其中 S1定义了宿主范围和病毒的特异性,从而识别并与受体宿主细胞的受体结合;S2 则含有膜融合过程所需的基本原件!
02 MP SARS-CoV-2单克隆抗体
今年2月初开始,MP Biomedicals接连发布发布了CoV-2 Spike蛋白单克隆抗体,这三种单克隆抗体可识别SARS-CoV-2蛋白的不同位点。Anti-coronavirus (SARS-CoV-2) Spike S1可识别Spike蛋 白S1亚基的位点,Anti-coronavirus (SARS-CoV-2) Spike S2和Anti-coronavirus (SARS-CoV-2) (B) Spike S2可分别识别Spike蛋白S2亚 基的不同位点。单克隆抗体可适用于多种应用场景,包括Western blot、免疫沉淀、ELISA实验、快速检测和流式细胞分析等。
实验数据表明,在65 ng至4.0625 ng的系列稀释分析中,MP公司针对SARS-CoV-2 Spike蛋白的单克隆抗体表现出高灵敏度和高亲和力。
图2:Slot-Blot分析SARS-CoV-2 Spike蛋白(S1 + S2) 与两种抗冠状病毒 (SARS-CoV-2) Spike蛋白抗体之间的相互作用。
03 MP SARS-CoV-2重组蛋白
除了单克隆抗体,MP Biomedicals还可提供大肠杆菌和HEK293细胞表达的一系列冠状病毒重组蛋白,包括S蛋白, 宿主受体ACE2和N蛋白。冠状病毒S蛋白是一种大型的I型跨膜蛋白,分为S1和S2两个亚基。S1通过与宿主受体ACE2结合促 进病毒感染。ACE2是一种外肽酶,可催化血管紧张素I向九肽血管紧张素的转化,或将血管紧张素II转化为血管紧张素1-7。N蛋白是冠状病毒中含量最丰富的蛋白质,是一种高度免疫原性的磷蛋白,具有高度保守性。
MP Biomedicals是全球少数能够全面提供生命科学、精细化学及临床诊断类产品的公司之一。目前生产和销售的产品超过5.5万种,在生命科学及体外诊断领域品牌认可度高,主要产品已通过欧盟CE、中国CFDA、美国FDA等卫生监管部门的认证。
经过50多年的发展,MP已经形成了布局全球的销售网络和渠道。MP 总部位于美国加利福尼亚州,在中国、新加坡、澳大利亚、法国等全球14个国家设有16家子公司。北京泽平科技2019年成为MP一级代理,为广大用户提供各类MP 系产品。北京泽平科技有限责任公司成立于2003年3月,一直致力为中国用户提供全球最先进的生物试剂、科学仪器、实验室消耗品、化工原料及医药中间体等技术服务。泽平科技成立至今,已与近百家国际一线技术供应商品牌建立了长效稳定合作机制,产品技术服务囊括近2000多个品类。立足北京,放眼全球,泽平科技“以最先进技术服务用户”为己任,国内服务用户已超过20000家。微信请搜索”泽平科技“公众号进入咨询。
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