14项IgG样双特异性抗体工艺
疾病通常由多因素引起，单克隆抗体针对单一靶点，有时疗效甚微。联合用药，可能产生不受控制的毒副作用。双特异性抗体同时结合两个不同靶点，或者同一个靶点的不同表位，在一定程度上解决了这个问题。
双特异性抗体目前有超过200种format，大体可分为IgG样双特异性抗体和非IgG样双特异性抗体。本文简述IgG样双特异性抗体。
1. Quadroma ( Hybrid-Hybridoma) 技术
1983年来自于MRC的科学家Milstein,C.和来自于牛津大学的Cuello, A. C.建立了Hybrid-Hybridoma技术，使用两个杂交瘤体细胞融合产生产生双特异性抗体。每种杂交瘤表达其中一种单克隆抗体，然后，然后两个抗体表达杂交瘤细胞融合，表达来自于两个母本的IgG轻链和重链。作为第一个生产双特异性抗体的技术，产量低，轻重链随机组合导致均一性差，纯化难度大。
文献1
2. 嵌合体Quadroma技术
为了解决轻重链随机组合引起的均一性差的问题，1995年德国科学家H Lindhofer开发了小鼠-大鼠嵌合体Quadroma技术。比起第一代Quadroma技术，小鼠-大鼠嵌合体双特异性抗体富集纯化更加方便，ProteinA不结合大鼠抗体，而在pH5.8时，双特异性抗体可以被洗脱，pH3.5小鼠母本抗体被洗脱。
第一个双特异性抗体Catumaxomab(anti-EpCAMx anti-CD3)即为小鼠-大鼠嵌合体Quadroma技术产物，2009年欧洲获批。
重链组装，通常的策略是两个不同的重链结构或者电荷互补。重链形成二聚体多是通过Fc的CH3结构域，不同的技术平台主要集中在对CH3的改造。
3. knobs-into-holes (KIH) 杵臼结构
KIH最早是1953年Crick 提出的α螺旋中氨基酸侧链的包装模型，1996年Genentech的Carter和他的同事基于此开发了双抗重链组装的KIH技术（文献6），Knob是小氨基酸被大氨基酸替换（如T366W），将其插入到Hole（大氨基酸被小氨基酸替换）中，这是第一个进行双抗重链组装的技术平台。
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