dss造模原理肠炎模式动物造模
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《肠炎模式动物造模解决方案 | 葡聚糖硫酸钠DSS》
结直肠癌是世界范围内肿瘤患者的第三大死因,它是一种自发性、慢性结肠黏膜炎症病变,其发病机制目前尚未清楚。但研究发现,人类最常见的两种慢性炎症性肠道疾病(IBD)是溃疡性结肠炎 (ulcerative colitis,UC)和 Chron’s疾病(CD),它们均与结直肠癌发生相关。自从日本学者于1985年首次应用硫酸葡聚糖(DSS)制备了鼠UC模型后,大量的动物模型被应用于UC的研究,而DSS结肠炎模型是目前应用最为广泛的UC模型之一。
01
MP
UC建模概述
现行研究中最常用的UC建模类型大约分为:自发模型、诱导模型(化学药物诱导:TNBS三硝基苯磺酸,DSS葡聚糖硫酸钠等、免疫学方法诱导、细胞移植诱导)以及基因修饰模型等。
葡聚糖硫酸钠盐(Dextran Sulfate Sodium Salt, DSS)是一种聚阴离子衍生物,其诱导结肠炎模型的机制虽仍未十分明确, 但通常认为与巨噬细胞功能失调、肠道菌群失调、DSS对结肠上皮的毒性作用、细胞因子在DSS结肠炎模型的发病中起重要作用(肿瘤坏死因子、白介素、干扰素、IL-10和IL-12)等机制有关。
对比多种UC建模类型,DSS造模具有很大的优势,可以说是目前肠炎造模研究领域金标准。
DSS造模的优势大约可以总结为以下几点:
·症状、体征以及病理特征等完全与人类UC基本一致;
·周期可长可短,能够模拟急性肠炎,慢性肠炎以及肠炎修复模型;
·方法简单,可重复性,维持性好;
·可作为研究人类UC的致炎机制及抗炎药物模型,也可以作为免疫机制及遗传学研究的模型。
MP Biomedicals生产的DSS具有高质量、高纯度、高重复性的特点。迄今为止,有超过8000篇科学文献引用,有效性得到了业界广泛认可。
给小鼠正常喂食并用2%的DSS代替饮用水,持续一周,然后处死。每天监测每只小鼠的体重。数据表示方法为SD标准差(数据来源于Bamba S. et al., (2012). Dig Dis Sci, 57(2): 327-34)。
产品名称 |
货号 |
包装 |
葡聚糖硫酸钠(DSS) |
0216011010 |
10g |
0216011050 |
50g |
|
0216011080 |
100g |
|
0216011090 |
500g |
|
MP产品优势:
·提供最高的硫含量(18-20%),<0.2%的游离硫酸钠(影响造模成功的决定因素);
·最高手性;
·最高纯度(99%)和稳定性;
·行内性价比最高的造模产品;
·超过8000篇文献引用。
02
MP
DSS建模实验步骤
小鼠急性\慢性结肠炎模型示意:
葡聚糖硫酸钠致小鼠结肠炎模型的建立与评价:
DSS肠炎造模的观察指标和方法:
1.疾病活动指数(DAI)的评估:包括体重,大便性状和血便;
DAI评分标准:
体重下降(%) |
大便性状* |
大便隐血/肉眼血便 |
记分 |
0 |
正常 |
正常 |
0 |
1~5 |
松散 |
隐血阳性 |
1 |
5~10 |
2 |
||
10~15 |
稀便 |
肉眼血便 |
3 |
>15 |
4 |
||
*正常大便:成型大便;松散大便;不黏附于肛门的糊状、半成形大便;稀便:可黏附于肛门的稀水样便。 |
2.组织学损伤指数(HI)的评估:观察结肠内有无出血,溃疡等。取一小块组织常规石蜡包埋、切片、HE染色,观察组织学改变并进行评分;
3.病理切片,HE染色观察。
03
MP
DSS肠炎模型应用
MP的DSS具有高质量、高纯度、可重复性的特点。可用于溃疡性结肠炎病因、发病机制的研究,炎症反应中免疫学研究,溃疡性结肠炎治疗,抗炎药物的研发、炎症相关性的癌症形成机制的研究等。可有效用于临床、分子生物学、生物医学甚至是化妆品行业。
AOM联合DSS高效诱导结直肠肿瘤应用
偶氮甲烷(Azoxymethane, AOM )
一种甲基化剂,可以在DNA中形成6-O-甲基鸟嘌呤,导致碱基错配,从而诱导组织中的肿瘤形成。
产品名称 |
货号 |
包装 |
偶氮甲烷AOM |
02180139.1 |
10g |
AOM/DSS 模型
AOM常与致炎剂DSS协同作用,可诱导炎症性肠病(IBD)逐步发展为炎症相关的结直肠肿瘤。AOM/DSS模型能够很好地模拟慢性肠道炎症诱发肿瘤的病理过程,被广泛用于炎症相关性肿瘤形成机制的研究。
AOM+DSS诱导的结肠肿瘤模型病理HE染色
AOM/DSS造模优势:
·方法简单;
·重复性高;
·7-10周即可建立肿瘤模型;
·可用于任何遗传背景的动物(敲除、转基因等)。
无PCR基因简单快速提取应用
MP出品FastDNATM Spin粪便试剂盒是基于DSS在基因提取应用上的重要突破。FastDNATM Spin粪便试剂盒可从新鲜或冷冻的人或动物的粪便样本中纯化基因组DNA,无需使用其他有机溶剂。该试剂盒包含裂解介质E,与Fastprep-24 5G配合使用可在40秒内裂解样本。使得样本中的基因组DNA、少量的RNA、腐殖酸或多酚等污染物充分释放到溶液中,离心后,基因组DNA被结合到Geneclean®专利的硅胶基质上,然后再用洗脱液将DNA洗脱下来,去除RNA、PCR抑制剂及有机污染物。得到的DNA可直接用于PCR、Real-Time PCR、传染病研究和筛查等下游实验。方便的离心柱纯化过程使得实验操作更加简单、便捷。
其与FastPrep-24TM 5G快速样品制备仪配合使用,粪便样本能够在短短几十秒内破碎。
利用FastDNATM Spin粪便试剂盒,从粪便样本中提取得到的基因组DNA的凝胶电泳结果。1.2%的凝胶(0.5X TE)。①DNA Marker ②牛粪便,200ng DNA ③马粪便,200ng DNA ④猫粪便,200ng DNA ⑤鸟粪便,200ng DNA
参考文献:
1. Q. Jia, I.Ivanov, Z.Zlatev, et al., Dietary _sh oil and curcumin combine to modulate colonic cytokinetics and gene expression in dextran sulfate sodium treated mice, Br.J.Nutr., 2011;106(4),519-9.
2. R.Arsenescu, V.Arsenescu, J.Zhong et al, Role of xenobiotic receptor in in_ammatorybowel disease, In_amm.Bowel Dis.,2011;17(5), 1149-2.
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