Kamiya丨Kamiya艾美捷人β2-微球蛋白ELISA说明书
Kamiya艾美捷人β2-微球蛋白ELISA预期用途:
人β2-微球蛋白ELISA是一种高度敏感的双位点酶联免疫测定(ELISA)人类生物样品中β2-微球蛋白的定量测定。仅供研究使用。
β2-微球蛋白(B2M)是一种11 kDA蛋白。它形成MHC I类分子的亚基,并与包括淋巴细胞在内的许多细胞的外膜。它在正常人的血清和尿液中含量很低,但在患有肾脏疾病、肾脏移植和各种其他炎症和传染性疾病的人群中浓度较高条件。
Kamiya艾美捷人β2-微球蛋白ELISA原理:
在本试验中,β2-微球蛋白存在于样品中的抗β2-微球蛋白抗体与吸附在聚苯乙烯微量滴定孔。通过洗涤去除未结合的蛋白质后加入辣根过氧化物酶(HRP)。这些酶标记的抗体与先前结合的B2M之间。在另一个洗涤步骤之后,通过添加显色底物3,3’,5,5’-TMB来测定与免疫吸附结合的酶。结合酶的数量与测试样品中B2M的浓度;因此,在450nm处的吸光度是B2M在测试样品。测试样品中B2M的量可根据以下公式构建的校准曲线进行插值:并对样品稀释进行校正。
Kamiya艾美捷人β2-微球蛋白ELISA试剂制备:
1.浓缩稀释剂
提供的稀释剂溶液为5倍浓缩液,必须用蒸馏水或去离子水稀释1:5。
2.浓缩洗涤液
提供的洗涤液为20X浓缩液,必须用蒸馏水或去离子水稀释1:20。结晶当储存温度较低时,精矿中的形成并不罕见。将精矿加热至稀释前30-35°C可溶解晶体。
3.酶抗体结合物浓缩物
通过添加10µL计算每个微量滴定板测试条所需的工作标记溶液量酶抗体缀合物与990µL 1X稀释剂,用于每个测试条。混合均匀,但轻轻地避免起泡。使用前立即稀释并避光。
4.TMB基板溶液
随附随用。
5.停止解决方案
随附随用。
6.微量滴定板
随附随用。打开微量滴定袋并从袋中取出板。移除所有将不得用于分析,将其放回袋中,并与干燥剂一起重新密封。
7.人β2-微球蛋白校准器
将1.0mL蒸馏水或去离子水加入冻干人B2M校准器中,轻轻混合直至溶解。校准品现在的浓度为715.0 ng/mL(重组校准品应等分如果打算将来使用,则冻结)。在每一步之间充分混合。避免起泡。
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