【评测】Lonza培养基、无血清培养基

传统概念里面，血清可谓是细胞的口粮，那可是断不得的。去年，由于国外某地疯牛病疫情，产于该国的牛血清禁止进口，市面上牛血清紧缺，奸商奇货可居，乘机涨价，一瓶500ml的胎牛血清价格竟然上了万，令人发指。某国际大牌血清供应商，违反长期供货协议，一年内数次涨价，还动辄断货，武汉某研究所，忍无可忍，与之对簿公堂。

其实，细胞还是可以尝试其他口粮的，凡事都需要未雨绸缪，早就开始使用无血清培养基的实验室，那是多么幸运，多么具有远见呀。

什么是无血清培养基？

通常情况下，动物细胞的生长有赖于血清的存在，在普通培养基中，如不加血清，绝大部分细胞不能增殖。目前，血清培养基中通常添加的比较好的血清是牛血清。但存在几个缺点：

一：细胞培养中使用牛血清存在污染外源病毒和致病因子的风险；

二：由于生产工艺等条件的限制，造成不同批次牛血清间的生物活性和因子的不一致，导致产品和实验结果的重现性差：

三：同时血清中复杂的成份，也使后续的实验分析变得复杂；

四：由于一些外来因素，比如血清原产国发生疫病，进口中断，出现不可预测的断货。

无血清培养基是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。与传统培养基相比具有以下优势：

可避免血清批次间的不稳定性，提高细胞培养和实验结果的重复性。
避免血清源污染及血清成份对实验分析的影响。
无血清培养基成份确定，批次重复性好，可大规模放大生产。

关于Lonza公司：

Lonza集团是一家以生命科学产品为主导，在生物化学、精细化工、功能化学等行业均处于领先地位的全球性跨国公司，具有一百多年历史，总部位于瑞士巴塞尔，在欧洲、美洲、亚洲总共有35个研发和生产中心，其中大部分生物技术产品在美国研发生产。

Lonza作为细胞培养产品和方案的创新领先者和标准提供者，于2012年10月接受美国医学研究核心机构——国家健康研究院（NIH）的委托，按照GMP生产所要求的品质管理标准管理其iPS细胞库。

Lonza公司的细胞培养产品主要有特定细胞的原代细胞生长培养基，通用无血清培养基（General Purpose Serum-free Medium），特殊用途无血清培养基（Specialty Serum-free Media），普通培养基，无蛋白和限定化学成分培养基（Chemically Defined Serum-free Media）等细胞培养基类产品和内毒素检测试剂盒等生命科学产品。

Lonza公司的产品还包括真核细胞转染仪器及试剂，内毒素检测类产品，基因有限公司作为其大陆地区代理商，以更优异的产品质量和专业服务提供给广大用户。

这里主要介绍一款通用型无血清培养基和一款针对人ES/iPS的无血清培养基。

UltraCULTURE™通用型无血清培养基

UltraCULTURE™培养基(Cat. No. 12-725F)是一款用于培养多种哺乳动物细胞的通用型无血清培养基。该培养基以DMEM:F-12培养基为基础，并含有重组人胰岛素、牛转铁蛋白和纯化牛血清蛋白混合物等补充成分。UltraCULTURE™培养基的总蛋白浓度大约为3mg/ml，不含L-谷氨酰胺，在使用前需加入5ml 200 mM的L-谷氨酰胺(Cat. Nos. 17-605 或 17-905)。UltraCULTURE™可用于多种主要组织来源细胞和已构建细胞系的生长，例如用于支持杂交瘤细胞形成过程中细胞的融合、淋巴组织来源细胞包括单核细胞和巨噬细胞的生长等。上皮细胞和成纤维细胞也可使用该培养基进行培养，并可实现内皮细胞在低血清浓度环境下的生长（5%胎牛血清）。在疫苗生产中， UltraCULTURE™培养基可作为完全培养基用于病毒颗粒的产生。UltraCULTURE™培养基可与防冷冻培养基(Cat. No. 12-132)配套使用，实现在无血清环境下冻存细胞。

UltraCULTURE™培养基是一款可用于多种粘附和非粘附细胞系生长的完全通用的无血清培养基，培养基配方已提交FDA备案。该产品是即用型产品，只需每500ml加入5ml L-谷氨酰胺(cat. no. 17-605) 即可。

部分使用UltraCULTURE™培养基培养细胞列表

L7™胚胎干细胞/人诱导多能干细胞培养基

L7™胚胎干细胞/人诱导多能干细胞培养基，可用于胚胎干细胞和人诱导多能干细胞维持和扩增的化学限定无血清培养基。与常见的胚胎干细胞培养基不同，L7™ ES/iPS培养基并不是以DMEM-F12培养基为基础进行改良，而是专门针对胚胎干细胞/诱导多能干细胞生长需要单独设计的特定培养基，可支持细胞的隔天换液。当与L7™胚胎干细胞/人诱导多能干细胞培养系统其它产品配套使用时，可实现从细胞培养到冻存的完全无血清操作。

非DMEM-F12基础配方，支持隔天换液，效果无差异。
低bFGF浓度，不影响培养后期的诱导分化。
化学限定，无动物源成分，更有利于从科研向临床转化。
符合cGMP生产标准。
包含基础培养基和生长因子补充剂两部分。

上图：hESC-H7使用常规培养基每天换液与使用L7培养基隔天换液细胞培养结果比较

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