血浆/血清游离RNA或外泌体RNA是某些癌症和疾病的潜在生物标志物。如何从收集与保存的血浆和血清样本中分离出RNA(cf-RNA)呢?

血浆游离RNA提取试剂盒

从不同体积的血浆中纯化cf-RNA。该血浆由EDTA收集的血液中制备而来。然后将3ul纯化的RNA用作RT-qPCR反应中的模板,以检测miR-21(图A)和5S rRNA转录物(图B)。miR-21和5S rRNA转录物的相对含量随着样上样量的增加而线性增加。

将纯化的cf-RNA洗脱至不同的体积。然后将3ul纯化的RNA用作RT-qPCR反应中的模板,以检测miR-21。随着洗脱体积的增加,miR-21的相对量增加,表明在非常低的洗脱体积中血浆cf-RNA仍然有比较好的有效浓度。

血浆/血清RNA提取试剂盒各品牌横向对比

血浆中miRNA有效性和一致性检测。Norgen试剂盒与Q、A、E试剂盒从血浆中分离miRNA。使用miR-21特异的引物进行茎环RT-qPCR。与其他分离方法相比,只有艾美捷试剂盒能够显示miR-21转录本高一致性和回收率的产品。使用Norgen试剂盒从200μL血浆中回收miRNA高于使用竞争对手A试剂盒从600μL纯化的RNA中回收的miRNA。

艾美捷血浆游离RNA提取试剂盒的特色与优势:

1.分离所有大小的游离和外泌体RNA,包括microRNA;

2.多种血浆和血清输入量(50µL-5mL);

3.没有苯酚提取物;

4.没有载体RNA;

5.结合并洗脱所有RNA,无论大小或GC含量如何,无偏差

6.将游离的RNA和外泌体RNA浓缩至灵活的洗脱体积;

7.短时间内纯化高质量的RNA。

8.纯化的血浆/血清RNA可用于很多下游应用,包括PCR,qPCR,甲基化敏感的逆转录qPCR,逆转录PCR,RNA印迹,RNA酶保护和引物延伸,表达阵列测定和NGS。

文献参考:

1.MicroRNA molecular profiling from matched tumor and bio-fluids in bladder cancer.Molecular Cancer. 2015.

2.Serum microRNA-34a is potential biomarker for inflammation in nonalcoholic fatty liver disease.Asian Biomedicine. 2016.

3.Circulating MicroRNAs: Association with Lung Function in Asthma.PLOS ONE. 2016.

4.Circulating nucleic acids damage DNA of healthy cells by integrating into their genomes.Journal of Biosciences. 2015.

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