• 产品介绍

    • BSA产品介绍

      • 1.1研究目的

        • 基因定位
      • 1.2基本概念

        • Bulked Segregant Analysis,分离群体分组分析法
        • 定义:

          • 在性状分离的遗传群体中 ,选择表型极端差异个体将其DNA等量混合,分别构建DNA混池,与性状 相关SNP的等位位点频率在混池间表现出显著差异, 而非相关SNP的等位位点频率无明显差异,从而可以 通过比较混池间SNP得到候选区间。
        • 原理:等位基因频率差异
      • 1.3技术流程

        • 选择合适亲本构建遗传群体
        • 调查表型,选取极端表型的个体构建DNA混池
        • 对端混池及亲本进行高通量测序,鉴别多态性标记,进行关联分析
        • 结合物种的参考基因组序列,对定位区间基因做功能注释
      • 1.4性状选择

        • 突变性状

          • 自然突变:在大田、苗圃中发现的突变个体
          • 人工诱变:利用化学和物理方式诱变得到突变个体
        • 质量性状

          • 根据子代的分离比推断性状属性

            • 单基因:F2,3:1 两基因:F2,15:1
        • 有主效位点的数量性状
      • 1.5混池大小

        • 大小:建议30+30以上;
        • 数量性状:单个混池占群体规模的15%以下
        • 质量性状:随机选
        • 性状选择一定要极端; 混池规模尽量大;
      • 1.6 BSA取样

        • 取样时期

          • ➢ BSR:在前期研究基础上,取样时期在目的基因表达时期和部位。
          • ➢ WG-BSA、SLAF-BSA取样时期:幼嫩组织。
        • 混池选择

          • ➢ 建议两个混池都取样,尤其突变性状。
        • 亲本取样

          • ➢ 建议亲本取样。信息分析时,亲本首先比对到参考基因组,分析两个亲本间的SNPs,然后 在混池中对这些SNPs进行分型,可以有效的提高SNPs的准确性。有亲本BSA分析会使用ED 和ΔSNP-Index两种方法进行分析,最后去两种结果的交集,提高定位准确度。
      • 1.7 DNA-BSA中特例——MutMap

        • 前提条件:EMS诱导的点突变,突变性状为隐形性状
        • 群体构建:野生亲本和突变亲本杂交构建的分离群体
        • 送样:1个野生型亲本+1个突变表型子代混池
      • 1.8 关联算法

        • —SNP-index

          • 以母本碱基类型频率为分母,混池检测为分子,隐性池-显性池
          • 混池间的基因型频率差异
          • 必须有2个亲本,且2个亲本与混池性状关系对应 SNP-index= ρ(隐性)/(ρ(显性)+ρ(隐性)) ΔSNP-index= SNP-index(隐性池)- SNP-index(显性 池)
        • 欧氏距离ED法

          • 计算欧式距离(空间几何距离)
        • 对于有双亲的BSA分析,百迈客使用SNP-index、ED两种算法同时计算,然后取两 种方法的交集区间。
      • 1.9 BSA和遗传图的区别

        • 表格

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