2020.11.10丨BSA基础知识及产品介绍
- 产品介绍
- BSA产品介绍
- 1.1研究目的
- 基因定位
- 1.2基本概念
- Bulked Segregant Analysis,分离群体分组分析法
- 定义:
- 在性状分离的遗传群体中 ,选择表型极端差异个体将其DNA等量混合,分别构建DNA混池,与性状 相关SNP的等位位点频率在混池间表现出显著差异, 而非相关SNP的等位位点频率无明显差异,从而可以 通过比较混池间SNP得到候选区间。
- 原理:等位基因频率差异
- 1.3技术流程
- 选择合适亲本构建遗传群体
- 调查表型,选取极端表型的个体构建DNA混池
- 对端混池及亲本进行高通量测序,鉴别多态性标记,进行关联分析
- 结合物种的参考基因组序列,对定位区间基因做功能注释
- 1.4性状选择
- 突变性状
- 自然突变:在大田、苗圃中发现的突变个体
- 人工诱变:利用化学和物理方式诱变得到突变个体
- 质量性状
- 根据子代的分离比推断性状属性
- 单基因:F2,3:1 两基因:F2,15:1
- 根据子代的分离比推断性状属性
- 有主效位点的数量性状
- 突变性状
- 1.5混池大小
- 大小:建议30+30以上;
- 数量性状:单个混池占群体规模的15%以下
- 质量性状:随机选
- 性状选择一定要极端; 混池规模尽量大;
- 1.6 BSA取样
- 取样时期
- ➢ BSR:在前期研究基础上,取样时期在目的基因表达时期和部位。
- ➢ WG-BSA、SLAF-BSA取样时期:幼嫩组织。
- 混池选择
- ➢ 建议两个混池都取样,尤其突变性状。
- 亲本取样
- ➢ 建议亲本取样。信息分析时,亲本首先比对到参考基因组,分析两个亲本间的SNPs,然后 在混池中对这些SNPs进行分型,可以有效的提高SNPs的准确性。有亲本BSA分析会使用ED 和ΔSNP-Index两种方法进行分析,最后去两种结果的交集,提高定位准确度。
- 取样时期
- 1.7 DNA-BSA中特例——MutMap
- 前提条件:EMS诱导的点突变,突变性状为隐形性状
- 群体构建:野生亲本和突变亲本杂交构建的分离群体
- 送样:1个野生型亲本+1个突变表型子代混池
- 1.8 关联算法
- —SNP-index
- 以母本碱基类型频率为分母,混池检测为分子,隐性池-显性池
- 混池间的基因型频率差异
- 必须有2个亲本,且2个亲本与混池性状关系对应 SNP-index= ρ(隐性)/(ρ(显性)+ρ(隐性)) ΔSNP-index= SNP-index(隐性池)- SNP-index(显性 池)
- 欧氏距离ED法
- 计算欧式距离(空间几何距离)
- 对于有双亲的BSA分析,百迈客使用SNP-index、ED两种算法同时计算,然后取两 种方法的交集区间。
- —SNP-index
- 1.9 BSA和遗传图的区别
- 表格
- 1.1研究目的
- BSA产品介绍
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