艾美捷测序级 II，纯化胰蛋白酶化验程序文献参考

胰蛋白酶是一种基于带正电荷的赖氨酸和精氨酸侧链的底物特异性胰丝氨酸蛋白酶（Brown and Wold 1973）。这种酶由胰腺排出，参与食物蛋白质的消化和其他生物过程。胰蛋白酶是一种中等大小的球状蛋白，作为一种无活性的胰蛋白酶原产生（Chen等人，2009）。

艾美捷测序级 II，纯化胰蛋白酶特异性：

胰蛋白酶在赖氨酸和精氨酸氨基酸残基的C端侧切割肽。如果脯氨酸残基位于切割位点的羧基侧，则不会发生切割。如果酸性残基位于裂解位点的任一侧，则水解速率已显示较慢。

艾美捷测序级 II，纯化胰蛋白酶化验程序：

将分光光度计设置在247 nm和25°C。

按如下方式将移液管移到每个反应杯中：

0.046万Tris⋅盐酸缓冲液，pH 8.1 2.6 ml

0.01 M TAME 0.3毫升

在25°C的分光光度计中孵育3-4分钟，以达到温度平衡，并建立空白率（如有）。添加0.1 ml稀释酶并记录A247 3-4分钟。根据曲线的初始线性部分确定ΔA247。反应保持线性至A247为约0.320。反应应线性至少三分钟。如果不是这样，重复使用较少的酶。

计算：其中540是对甲-苯-磺-酰基-L-精-氨-酸在247nm处的消光系数

艾美捷测序级 II，纯化胰蛋白酶相关文献：

Arakawa, T. , Hung, L. , McGinley, M. , Rohde, M. and Narhi, L.

Induced Resistance of Trypsin to Sodium Dodecylsulfate upon Complex Formation with Trypsin Inhibitor , J Protein Chem 11 , 171 , 1992

Arentoft, A. , Frokiaer, H. , Michaelsen, S. , Sorensen, H. and Sorensen, S.

High-performance Capillary Electrophoresis for the Determination of Trypsin and Chymotrypsin Inhibitors and Their Association with Trypsin, Chymotrypsin and Monoclonal Antibodies , J Chromatogr A 652 , 189 , 1993

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