分化成功的标志及特异性神经递质的检测
于SY5Y分化过程中施加rTMS,当其分化成功后,检测动作电位(active potential, AP)。检测AP前存在一个关键的问题----SY5Y 分化成功的鉴定。
近期读的文章,多是关于agent诱导SY5Y分化的。我着重关注了诱导分化的具体步骤和检测的物质。就目前接触到的文章而言,提到的成熟神经元的标志物包括但不局限于:生长相关蛋白(growth-associated protein ,GAP-43)、 神经元核抗原(neuronal nuclei ,NeuN),、突触素蛋白(synaptophysin ,SYN)、突触泡蛋白(synaptic vesicle protein II ,SV2)、突触相关蛋白-97(SAP–97)、 神经特异性烯醇化酶(neuron specific enolase ,NSE) 、 微观相关蛋白(icrotubule associated protein ,MAP)和神经丝蛋白(Tau)。尽管不同的研究者测量的指不同,但上述物质是神经元特异性标志是公认的。RA诱导SY5Y分化前后,通过化学免疫染色发现,SY5Y分化后神经特异性烯醇化酶(neuron specific enolase ,NSE)分布状态发生变化。由原来主要分布于细胞体质中,后在胞体和突触中的分布增加;或分化后染色呈阳性。分化后,胞体和神经突处的突触素蛋白(synaptophysin ,SYN)荧光强度显著增加。分化后,胞体和神经突处的突触相关蛋白-97(SAP–97)荧光强度显著增强;神经丝蛋白(Tau)分化前几乎不存在,分化后显著增加。多篇文章提到NeuN/MAP2是成熟神经元的特异性物质,分化后的SY5Y用514抗体染色显示,分化的SY5Y细胞与原代培养神经元几乎相似,western-blot检测MAP2的含量发现,分化后其含量显著增加。
从形态学上分析,分化后的SY5Y拥有广泛的神经突。一般认为,当突起长度大于50μm时,认为该细胞分化成功。
综上所述,接下来的实验中,可以生化方面选择MAP2、SYN作为测量指标,通过染色观测其分布鉴别分化成功与否;从形态学的角度讲,在尼康倒置显微镜下观测细胞形态,测量神经突起的长度判断细胞分化状态。
总体的实验思路是从宏观到微观,先探究rTMS对神经细胞增殖、分化、凋亡的作用。涉及到的实验技术包括MTT增殖检测、HE染色、免疫荧光染色、电生理膜片钳等。下一步探究具体的分子机制,包括各种特异性物质的表达水平等。前期的实验只需将SY5Y诱导为神经元细胞即可,后期的实验因不同的诱导剂介导不同的神经表型,因此要注意诱导剂的选择。
3月13号之前需要解决的问题是:
1. 确定要检测的物质;
2. 查看实验技术及需要的药品、试剂等;
3. SY5Y诱导分化的具体操作:RA的配制、培养基中血清浓度的选择、RA诱导时间;
4. rTMS刺激参数的选定;
分化成功的标志及特异性神经递质的检测相关推荐
- hadoop搭建成功的标志
加粗样式 针对hadoop搭建成功,小编看网上大多都是主机输入命令jps后,出现五个进程,不包括jps,其实判断的标准并非是这样的. 这与你的配置文件有关. 如有的人运行jps查看只有4个而没有Sec ...
- 谈团队沟通成功的标志
今天,团队web开发组组长和我一起探讨了关于团队沟通问题. 事情起因是这样的,因为是学生团队,毕竟不是那么职业化,大家的注意力都集中在了技术问题上,对于非技术的问题大家不是很在意啊,所以出现了不少问题 ...
- 港科夜闻|香港科技大学副校长(研究及发展)叶玉如教授团队成功开发出简单有效的血液检测方法...
关注并星标 每周阅读港科夜闻 建立新视野 开启新思维 1.香港科技大学副校长(研究及发展)叶玉如教授团队成功开发出简单有效的血液检测方法.由国际知名神经生物学家.香港科技大学副校长(研究及发展)叶玉如 ...
- python下载成功的标志_电脑安装python过后的图标
展开全部 1.进入Python官方网站下载安装包 点击32313133353236313431303231363533e58685e5aeb931333436323232导航栏的 Downloads ...
- Day 11 权力核金钱是成功得标志吗
1.今日话题 Some people think that money and power are the symbol of success. Do you agree or disagree wi ...
- CRM端 equipment hierarchy change成功的标志
Created by Jerry Wang, last modified on Oct 23, 2014 CRM的SMW01 tcode里应该能观察到BDOC CRM_IBASE_MESS为绿灯: 点 ...
- 加密狗在虚拟服务器上怎么注册,您好 我想问下 在虚拟机里面安装软件 装好后要进行加密狗注册 加密狗插进去显示安装成功 可是点击注册就提示检测不到加密锁 是什么原因呢?急急急...
用友U8 结算中心记账后客户资金余额不对:该客户数据在结转后删除了几个账户导致不能日记账,从2005年数据导入账户数据后可以正常记账,但在多次记账后客户资金余额显示不对,导致不能作付款单,提示赤字,不 ...
- Phenotypic Characterization of Retinoic Acid Differentiated SH-SY5Y Cells by Transcriptional Profili
Phenotypic Characterization of Retinoic Acid Differentiated SH-SY5Y Cells by Transcriptional Profili ...
- 中国互联网量级分化严重:小米将360踢出第二阵营
2014年已经远去,回顾去年,整个互联网有很多值得我们总结的东西,比如智能家居.智能汽车.大数据.移动电商等等,在去年都有相当不错的成就.不过,如果要用一个简单的词来概括去年互联网的发展轨迹,我们可以 ...
最新文章
- 如何自学python数据分析-Python学习干货 |如何用Python进行数据分析?
- java的Serialization 机制
- float取整数部分_一步一步学Python3(小学生也适用) 第六篇: 变量及整数(int)类型...
- FISCO BCOS 2.0发布:新增群组架构克服吞吐瓶颈
- Michael-Scott非阻塞队列(lock-free)算法的C实现
- oModel.create will also send to backend directly
- 【转】CentOS 6.6 升级GCC G++ (当前最新版本为v6.1.0) (完整)
- jsp,div 限制字数,超出部分用省略号代替
- python中星号数字乘字符串_Python系列-数字和字符串
- token验证+vuex的localStorage应用
- Oracle数据库日期格式转换操作
- [转载] Python中的set(集合)数据类型
- Flink简介以及与sparkStreaming和Storm比较
- scrapy简单示例
- 【单片机毕业设计】【mcuclub-103】智能花盆 | 智能养殖箱 | 多功能花盆 | 多功能养殖箱【仿真设计】
- HTML旅游网站设计与实现——东江湖旅游网站6个网页HTML+CSS+JavaScript
- [行为识别论文详解]TSN(Temporal Segment Networks)
- Stratifyd AI: 5,300万数据,800万用户,利用垂直论坛评论绘制精准用户性格画像
- 支付路由技术概述以及简单的建设说明
- 【GStreamer 】3-6 gstreamer jpegenc 、jpegdec 插件说明
热门文章
- 无法同时打开多个PPT,并排显示
- 遗传算法 python 简书_基于DEAP库的Python进化算法从入门到入土—(二)简单遗传算法实现...
- 部署keepalive+lvs多master节点高可用
- Hive Distribute by 应用之动态分区小文件过多问题优化
- 《SQL Server 2008从入门到精通》--20180724
- TM1637驱动数码管
- 苹果M1芯片及新产品布局对ARM生态影响
- ReactNative解决方案研究
- jQuery - 实例- 小小动画导航栏
- Oracle数据库备份与恢复命令