三代测序的基本原理、组装方法和应用场景
三代测序的基本原理、组装方法和应用场景
- PB/Nanopore测序原理及优缺点介绍
- PB:光信号,荧光基团结合碱基测序
- Nanopore:电信号
- 优点
- 无GC偏好性
- 缺点
- 错误率较高
- 有效孔只有三分之一
- 三代测序组装方法
- 参考文献:Comprehensive evaluation of non-hybrid genome assembly tools for third-generation PacBio long-read sequence data
- 常用软件
- Canu
- 纠错、修剪、组装
- FALCON(PB自主开发)
- 可做二倍体和单倍体
- 可通过Hi-C数据对二倍体进行组装
- MECAT
- 文献结论
- Canu
- 三代测序应用场景
- 基因组
- 测序优势
- 可价格低contig数量,减少后续拼接与注释的工作量,节省时间
- 提高了基因组组装的完整度
- 算法
- OLC
- DBG
- 测序优势
- 表观遗传学(甲基化)
- 总量鉴定
- 高通量测序
- 宏基因组
- 全场转录本
- 全长16S
- 基因组
- 二代+三代组装分析比较
- Nanopore组装效果比较好
- 优势
- 基因全面
- 组装N50效果好
- binning高质量基因组
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