中fuse_一种用于将mRNA快速转染到活细胞细胞质中的融合试剂
膜融合转染试剂,能够将mRNA快速转入活细胞的胞质内,对于原代细胞,干细胞具有极高的转染效率和低的细胞毒性。
应用
mRNA翻译和降级研究
蛋白质生化研究:合成,折叠,处理,稳定性,定位,降解
mRNA转染进入原代细胞中不需要基因修饰的组织
采用RNA-only CRISPR/Cas技术进行基因组改造工程
技术特点
全新的mRNA活细胞转染试剂
15-30分钟能完成mRNA转染
不需要胞吞过程
不需要溶酶体降解
不需要将基因转入细胞核中
专为成熟的(带5’-Capped和poly-A的)mRNA优化的转染试剂
较好的生物兼容性和极低的生物毒性
Fuse-It-mRNA即使在原代细胞中也具有高效的蛋白蛋白质合成速率.
将eGFP-mRNA置于Fuse-it-mRNA载体中,并与人正常表皮角细胞(nHEK)融合10分钟。两个半小时后就有50%的细胞表达eGFP,8小时后,几乎100%的细胞都能表达eGFP。
膜融合——蛋白表达直接的方法:
即时的mRNA转染
不像传统的脂质体转染技术,膜融合不需要胞吞作用来释放mRNA。内含mRNA的Fuse-it的脂载体,能够快速简单的与细胞膜相融合,并且将mRNA直接释放如细胞质中。mRNA翻译工作能够立即进行,不会受到胞吞,溶酶体降解,或者有丝分裂的影响。
在原代细胞也有极高的转染效率
Fuse-it-RNA采用与细胞膜一致的电极,能够有效的和多种细胞系进行膜融合。细胞系,无神经元,各种难以转染的原代细胞都能采用膜融合转染试剂将mRNA转入细胞质中。Fuse-it-mRNA的膜融合技术能够获得快速高效的蛋白表达而不会对基因组造成影响。
易于操作
Fuse-it-mRNA操作步骤非常容易掌握,因为融合试剂和mRNA的比例在各个实验中都是固定的。试剂安全性好,没有任何基因毒性,操作不需进行严格的生物防护。
极低的生物毒性
对比传统的脂质体转染试剂,Fuse-It-mRNA仅仅需要5-20分钟的孵育时间就能达到较大的mRNA转染效率。不仅如此,仅用很少量的Fuse-it试剂就能获得较大量的mRNA的转染效率,而不需要额外使用化学药剂,这样对于一些敏感的细胞不会造成细胞毒性。
使用Fuse-It-mRNA将eGFP-mRNA转入CHO-K1细胞后的蛋白合成:
2小时内就能在细胞中检测到eGFP的蛋白表达,并且,eGFP表达量在持续上升并且能持续稳定表达3天以上(90个小时)
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