elisa数据处理过程图解_elisa原理和分类附图解
一、
ELISA
的原理
ELISA
的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
结合在固相载
体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫
学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与
固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗
体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应
而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物
质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效
率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。
二、
ELISA
的类型
ELISA
可用于测定抗原,
也可用于测定抗体。
在这种测定方法中有三个必要
的试剂:
(
1
)固相的抗原或抗体,即
"
免疫吸附剂
"
(
immunosorbent
)
;
(
2
)酶标记的抗原或抗体,称为“酶联物”、“结合物”(
conjugate
)
;
(
3
)酶反应的底物。根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设
计出各种不同类型的检测方法。用于临床检验的
ELISA
主要有以下几种类
型:
(一)
双抗体夹心法测抗原
双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:
(
1
)
将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体
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