流式凋亡率计算_流式细胞仪检测细胞凋亡率案例分析报告

一、实验材料

NCI-H1299，购自上海晶莱生物技术有限公司。

表 2.1.1 主要试剂试剂与耗材厂家(货号)

细胞培养瓶FALCON 中国(353014)

Penicillin/streptomycin solution(KGY002)

0.25% Tripsin-EDTA(BK-E3076)

PBS(BK330-2)

胎牛血清GIBCO 美国(10270-106)

1640 培养基Hyclone 美国(SH3080901)

Annexin V-FITC/PI 凋亡试剂盒

二、实验仪器

表 2.2.1 主要仪器仪器厂家(型号)

超净工作台(SW-CJ-1FD)，中国

CO2 培养箱SANYO(XD-101)，日本

生物倒置显微镜OLYMPUS(IX51)，德国

台式低速离心机(80-2)，中国

振荡器(WH-2)，中国

立式压力锅(YXQ-LS-50)，中国

电热鼓风干燥箱(101AS-3)，中国

流式细胞仪BD 公司，型号 C6

三、实验方法

细胞培养

NCI-H1299 细胞培养于含 10% 胎牛血清、100 U/mL 青霉素、100 U/mL 链霉素的 1640 培养基中，在恒温培养箱中以 5%CO2、37 ℃ 以及饱和湿度条件下松盖培养，每 2~3 d 换液一次，当细胞长至 80% 铺满时再消化传代。

实验分组H1299 细胞-Con 组

lv-shCON 转染的 H1299 细胞

lv-shIFITM3 转染的 H1299 细胞

Annexin V-FITC/

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