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傅里叶变换红外光谱分析NMDA受体单克隆抗体抗-中国科技论文在线.PDF

2·90 · 生物化学与生物物理进展　　Prog. Biochem. Biophys. 　　　　　2003 ; 30 (2)

傅里叶变换红外光谱分析 NMDA 受体

单克隆抗体抗兴奋毒损伤机理

康晓楠1) 　孙长凯1) 　范　明2) 　宋占军3) 　赵　杰1) 　王吉庆4) 　施广霞5)

( 1) 大连医科大学脑疾病研究所 , 大连 116027 ; 2) 军事医学科学院基础医学研究所 , 北京 100850 ;

3) 军事医学科学院国家生物医学分析中心 , 北京 100850 ; 4) 解放军第 210 医院 , 大连 116021 ;

5) 大连医科大学病理生理学教研室 , 大连 116027)

( )

摘要　人 N甲基D门冬氨酸受体 NMDAR , NR 单克隆抗体 MABN1 具有明确的抗兴奋毒保护作用 , 但其机

制不明. 以MABN1 和 M K801 分别预处理海马细胞 , 拮抗谷氨酸兴奋毒损伤作用 , 采用傅里叶变换红外光谱

(FTIR) 技术 , 对不同处理后的海马细胞红外光谱特性进行比较. 将去卷积的酰胺 Ⅰ带进行曲线拟合后发现 ,

MABN1 组与 M K801 组的蛋白质二级结构有明显不同 , 提示二者在抗兴奋毒机制方面存在差别.

关键词　红外光谱 , 兴奋毒性 , 海马神经元

学科分类号　Q517

谷氨酸受体离子通道是中枢神经系统兴奋性突提供 ; 人转铁蛋白、谷氨酸单钠、M K801 、神经

触信号的传递者 , 是介导由谷氨酸 ( Glu) 及其他元特异烯醇化酶抗血清 ( neuron specific enolase ,

相关内源性氨基酸兴奋作用的跨膜蛋白 , 其中 NSE) 购自 Sigma 公司 ; 马血清、胎牛血清、

( ) MEM 培养粉购自 Hyclone 公司 ; 单克隆抗体

N甲基D门冬氨酸受体 NMDAR , NR 属于重

要的兴奋性神经递质受体之一. NMDA 受体主亚 MABN1 为自制 ; BioRad FTS65A 型傅里叶变换

基 NR1 是维持受体功能的必需亚基. 除了参与突红外光谱仪为BioRad 公司产品.

触可塑性、学习和记忆过程等正常生理过程 , 12 　海马神经元培养

( )

NMDA 受体还介导脑缺血、缺氧所致神经元死亡新生 Wistar 大鼠 0 ～1 天 , 75 %酒精灭菌 ,

的兴奋毒作用[1 ,2 ] . 鉴于 NMDA 受体在生理和病断头置冰上 , 解剖显微镜下快速剥离双侧完整海

( ) 马 , 剪碎后置 0125 %胰酶消化液中 , 于 37 ℃消化

理兴奋毒性脑损伤过程中的双重角色 , 人们致

力于发展高效、高选择性的 NMDA 受体拮抗剂用 30 min , 并制成 1 ×10 / ml 密度的细胞悬液 , 接种

于治疗中风等脑缺血损害[3 ] . 人 NMDA 受体单克于涂有多聚赖氨酸的 35 mm 塑料培养皿中 , 每皿

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